mir-224靶向rassf8在宫颈癌进展中的作用及其机制研究

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1、万方数据miR-224靶向RAASF8在宫颈癌进展中的作用及其机制研究⑧论文评阅人l：评阅人2：评阅人3：评阅人4：评阅人5：答辩委员会主席：委员1：委员2：委员3：委员4：委员5：程晓东主任医师浙江大学医学院附属妇产科医院叶枫副研究员浙江大学医学院附属妇产科医院赵小峰副主任医师浙江省人民医院万小云主任医师浙江大学医学院附属妇产科医院陈亚侠主任医师浙江大学医学院附属妇产科医院张平主任医师浙江省肿瘤医院答辩日期：2014-2—27万方数据浙江大学研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中

2、不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得逝姿盘堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者虢老籼乞签字嘿毒．，Ⅳ年夕月厂日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解逝姿盘堂有权保留并向国家有关部门或机构送交本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权逝姿盘堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：签字日期：韶j乙2乞山I忙7月厂日导师签名：≮

3、签字目期：．加·P日月3户《、手笔年万方数据浙江大学硕士学位论文致谢感谢导师谢幸教授对我在研究生期间的学习以及科研方面的耐心的指导。从实验方法的选择，实验结果的探讨，论文的撰写以及投稿等各个环节，谢老师都全程指导并且亲力亲为。谢幸教授治学态度科学严谨，耳濡目染之下改变了我的学术态度，这对我今后的学习和研究大有裨益。这两年多与导师的交流的过程中，我深刻体会到谢幸教授不仅理论知识渊博、洞察力惊人，而且对待学生宽容耐心，这些优秀品格是我永远仰望的一座高山，将一直激励着我使我终身受益。感谢吕卫国教授在研究生期间给予我的关心鼓励以及指导。吕老师对学生平易近人、和蔼可亲的模样将一直铭记并且温暖

4、我的心。感谢叶枫、程琪、王新宇、程晓东等老师对我实验的指导和生活中的帮助，感谢中心实验室其他各位老师的帮助，有你们的帮助我的课题能够顺利完成。感谢肿瘤组左鹏、李阳、许君芬、张松法、王培、等各位师姐师兄的指导和帮助。感谢肿瘤组的其他同学们，有了你们相伴科研生活不再乏味，认识你们是我在实验室度过的3年最宝贵的财富。感谢我的家人以及朋友对我的支持和默默的付出。最后再次向所有关心支持我的老师，同学和朋友致以最诚挚的谢意!黄永洁2014年1月万方数据浙江大学硕士学位论文中文摘要miR-224靶向RAASF8在宫颈癌进展中的作用及其机制研究浙江大学医学院硕士研究生导妇产科学黄永洁师谢幸教授中文

5、摘要目的：验证miR-224在宫颈癌组织中表达上调，并明确miR．224对宫颈癌细胞生物学行为的作用及调控机制。方法：采用Stem．100pRT．PCR法检测148例宫颈鳞癌组织和64例官颈正常上皮组织的miR-224的表达水平，收集整理临床病理资料，分析miR．224的表达水平与宫颈癌临床不良预后因素的相关性。在宫颈癌细胞株Siha和CaSki，利用细胞转染技术过表达miR．224t：A及siRNA干扰RASSF8的表达，利用MTT法检测细胞增殖能力，流式细胞技术检测细胞周期分布，划痕试验和Transwell侵袭试验检测细胞的迁移和侵袭能力，并利用RealtimeRT．PCR和W

6、esternBlot的方法检测官颈癌组织中RASSF8的mRNA和蛋白水平，最后利用双荧光素酶报告基因的方法确认miR-224-与RASSF8靶向关系结果：1．miR．224在宫颈鳞癌组织的表达水平与宫颈正常上皮组织相比显著下调。II万方数据浙江大学硕士学位论文中文摘要miR-224高表达组有更高FIGO分期、更大的肿瘤体积，更易于发生盆腔淋巴结转移、深间质浸润、以及脉管浸润。2．在宫颈癌细胞株中，过表达miR．224可增：加Siha和CaSld细胞的增殖能力，促进细胞划痕的愈合和细胞的侵袭并且下调RASSF8的蛋白水平，但是对周期以及凋亡无明显影响。3．宫颈癌组织中RASSF8的

7、表达量明显低于正常宫颈组织。4．miR．224可下调含RASSF83’UTR区报告质粒荧光素酶的活性，而不影响3’UTRN突变报告质粒的荧光素酶活性。5．在宫颈癌细胞中，干扰RAssF8的表达可促进Siha和CaSki细胞的迁移和侵袭能力但是对增值无影-向。结论：1．miR-224的表达水平在宫颈癌组织与正常组织相比显著上调并且miR．224高表达与宫颈癌预后不良因素相关．2．miR．224表达上调参与了宫颈癌的进展过程，miR．224通过靶向RASSF8调控宫颈癌细