mir-92bⅰ抑制胶质瘤恶性表型体外研究

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1、M诹．92bI抑制胶质瘤恶性表型体外研究论文作者签指导教师签论文评阅人1：评阅人2：评阅人3：评阅人4：评阅人5：答辩委员会主席：委员1：委员2：委员3：委员4：委员5：朱先理主任医师浙大医学院附属邵逸夫医院杨树旭主任医师浙大医学院附属邵逸夫医院黄李法主任医师浙江中医药大学附一院张建民主任医师浙大医学院附属第二医院刘伟国主任医师浙大医学院附属第二医院陈高主任医师浙大医学院附属第二医院陈书达主任医师浙江省人民医院王卫民主任医师杭州师范大学附属医院答辩日期：2014年2月浙江大学研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果

2、。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得逝姿苤堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。撇姗虢嘌净¨略州日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解逝姿态堂有权保留并向国家有关部门或机构送交本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权逝姿态堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)⋯一虢锑净翩虢L．1飞了签字日期．

3、z。／乒年弓月孑日签字日期．沙，肇弓?日浙江大学硕士学位论文致谢致谢在本文的完成之际，我谨以最诚挚的敬意感谢我的导师王义荣教授3年来在学>-j、工作、科研上对我的谆谆教诲，以及生活上的悉心关怀。王义荣教授严谨的治学态度、渊博的知识、创新的思维和高尚的人格给我留下了深刻的印象，并将使我终身受益。本研究从选题、立题、实验设计，到具体实验、结果分析，直至文章撰写和论文的修改都凝结了导师的心血和智慧的结晶。在王义荣教授的帮助下，我顺利完成了硕士研究生阶段课程的学>--j和课题的研究。衷心感谢浙江大学医学院附属邵逸夫医院神经外科杨树旭主任医师、朱先理主任医师及全体医生在工作和科研

4、中的指导以及支持。衷心感谢钱聪、宋正非、薛兆亮、马志明、陈铿等师兄弟对我的实验提供了很多宝贵的意见和建议。感谢神经外科王坤医生、沈富女护士长和全体护士、手术室老师们在实验过程、标本收集等方面给予的帮助和支持。感谢中心实验室老师在数据采集方面给予的大力帮助。感谢室友和同学与我在生活和学习上共同奋斗。尤其是王坤在实验技术和方法上的认真指导，使我受益匪浅。由衷地感谢我的父母、姐姐一直以来的无私奉献，他们给了我巨大的支持和鼓励，感谢我的家人并致以我最真挚和美好的祝福。最后，特别向论文评阅和答辩委员会的全体专家表示衷心的感谢。浙江大学硕士学位论文中文摘要MiR．92bI抑制胶质瘤

5、恶性表型体外研究背景和目的：浙江大学医学院神经外科硕士研究生万英锋导师王义荣教授中文摘要脑胶质瘤是中枢神经系统最常见的原发性肿瘤，由于恶性胶质瘤有侵袭性生长、增殖速度快等特征，应用目前的治疗措施如外科手术切除、术后放疗、化疗和免疫治疗等不能治愈，患者复发率很高，临床预后甚差。造成这种现状的原因，很大部位是对脑胶质瘤的病因，发病机制的认识不充分。为此，必须寻找与胶质瘤发生、发展相关的基因和信号通路，进一步深入了解胶质瘤发生发展的分子病理机制，寻找胶质瘤治疗的新靶点，在此基础上开拓胶质瘤治疗的新策略和新手段。有研究证实，Nemo．1ikekinase(NLK)是一种抑癌基因

6、，在体外的恶性肿瘤细胞株中的研究发现它可以通过促进肿瘤细胞的凋亡而起到抑癌作用，研究表明NLK能够促进人的结肠癌细胞DLD．1细胞株，乳腺癌细胞株和胶质瘤细胞株的凋亡[1-3]。但NLK在脑胶质瘤中的研究甚少，故可以初步认定NLK是一个胶质瘤抑癌基因。此外，为了寻找可调控NLK表达的microRNA，我们搜索了预测microRNA靶基因网站，包括TARGETSCAN，MIRANDA等，发现有很多的microRNA，包括miR．92b在NLKmRNA3’UTR上有潜在的结合位点，故本课题重点研究了miR-92bI抑制胶质瘤增殖、细胞周期进展、凋亡和侵袭的影响及其可能的作用

7、机制。II浙江大学硕士学位论文中文摘要方法和结果：本课题研究分为以下两个部分：第一部分中应用RealtimePCR的方法，检测了5个胶质瘤细胞系和38例不同级别人脑胶质瘤组织中miR．92b的表达水平。结果表明miR．92b在胶质瘤组织和细胞系中的表达较正常组织上调，并与肿瘤级别呈正相关。在课题第二部分，miR．92bI抑制胶质瘤恶性表型的体外研究。将miR．92bI转染至人脑胶质瘤细胞系SNBl9和LN229中。采用RealtimePCR检测转染后胶质瘤细胞的miR．92b表达水平以鉴定抑制效果；四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验评价细胞的增