活体观测骨髓间充质干细胞对肝癌微循环的作用及影响

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1、活体观测骨髓间充质干细胞对肝癌微循环的作用及影响计：学位论文：38页表格：1个插图：10幅王英新指导教师：巩鹏教授申请学位级别：硕士学位论文提交日期：2012年4月学位授予单位：大连医科大学专业名称：外科学论文答辩日期：2012年5月学位授予日期：2012年6月评阅人：答辩委员会主席：独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任

2、何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：蝴签字日期：丝年立月／_A日关于学位论文使用授权的说明《活体观测骨髓间充质于细胞对肝癌微循环的作用及影响》系本人在大连医科大学攻读(博士、硕士)学位期间在导师指导下完成的学位论文。本人及指导教师完全了解大连医科大学关于保存、使用学位论文的规定，同意学校保留并向有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版本，允许论文被查阅和借阅，同意学校将本论文加入：1．中国学术期刊(光盘版)电子杂志社——《中国博士学位论文全文数据库》、《中国优秀硕士学位论文全文数据库》及CNKI相关数据库。2．中国科学技术信息研究

3、所——《中国学位论文全文数据库》3．国家图书馆本人授权大连医科大学，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存、汇编学位论文，可以公布论文的全部或部分内容。签字日期：丝年旦月笪曰目录一、摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l(一)中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(二)英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3二、正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯”8111D⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5(一)前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5(二)对象与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6(三)结果⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯13(四)讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l6(五)结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯20(六)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2l三、综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯IDQO00000001DOOIIDO⋯⋯⋯⋯24(一)综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24(二)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30四、附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯34五、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯38活体观测

5、骨髓间充质干细胞对肝癌微循环的作用及影响硕士研究生：指导教师：指导小组：专业名称：王英新巩鹏教授王忠裕教授外科学摘要目的：原发性肝癌是目前临床治疗的难点，近期关于应用干细胞移植治疗肝脏疾病的研究逐渐引起了重视。已有人提出，骨髓间充质干细胞(bonemarrowmesenchymalstemcells，BMSCs)在肝脏微环境下可转化为肝干细胞和类肝样细胞，在肝切除等肝损伤的刺激下，BMSCs可向受损部位趋化、定植，通过转化为具有部分功能的类肝样细胞，促进肝再生。然而，BMSCs对于肝癌组织或细胞的作用及机制尚不明确。本实验通过观测肝癌移植区血管生成情况，旨在

6、探究BMSCs对肝癌微循环的作用及影响。方法：采用全骨髓培养法分离、培养提取到的大鼠骨髓，获得BMSCs，并采用流式细胞仪技术(FCM)鉴定传代至第3代的贴壁细胞，检测表面抗原的表达。应用骨髓问充质干细胞条件培养基(BMSCs．CM)培养肝癌细胞，并采用MTT法检测干细胞对肝癌细胞系HepG一2增殖情况的影响。建立裸鼠背部皮肤皱褶小室(dorsalskinfoldchamber)肝癌模型。将实验鼠分四组：A空白对照组、B单纯BMSCs细胞移植组、C单纯肝癌HepG．2细胞移植组、DBMSCs与肝癌细胞共移植组，后应用活体荧光技术检测Od、7d、14d时各组视

7、窗区微血管密度，并分析结果。结果：应用流式细胞仪检测提取、分离到的第3代骨髓间充质干细胞显示：CD29细胞计数阳性率为97．3％；CD90细胞计数阳性率为98．1％；CD34细胞计数阳性率为1．6％；CD45细胞计数阳性率为2．9％。应用MTT法检测后发现：与0BMSCs—CM培养的肝癌细胞相比，25％、50％、75％、100％BMSCs—CM组的肝癌细胞增殖率均有提高(P<0．05)。本实验成功建立了裸鼠背部皮肤皱褶小室肝癌模型，并分别检测了各组在0d、7d、14d时的微循环密度：A组在Od、7d、14d时的微血管密度分别为148．12±14．23、151

8、．85±11．61、161．49±17．24(cm／