云芝糖肽对人pbmc中tlr信号通路调控机制的研究

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1、重庆医科大学硕士学位论文云芝糖肽对人PBMC中TLR信号通路调控机制的研究姓名：陈楚申请学位级别：硕士专业：免疫学指导教师：鲍依衡201205重庆医科大学硕士研究生学位论文。云芝糖肽对人PBMC中TLR信号通路调控机制的研究摘要目的：通过对云芝糖肽(PSP)作用人外周血单个核细胞(PBMC)后，TLR信号通路中关键节点基因的表达和关键蛋白的表达的研究，明确PSP对TLR信号通路的免疫调控作用，探索PSP的免疫调控和免疫抗肿瘤机制。方法：体外分离、培养人PBMC，分为对照组矛NPSP处理组，植物血凝素(PHA)诱导增

2、殖，采用实时荧光定量PCR(Q．PCR)技术对人PBMC中TLR信号通路中相关基因的表达差异情况进行定量分析，同时对TLR通路中关键节点采用免疫蛋白印迹法(Western—blot)检测其蛋白水平表达情况。结果：PSP处理盼实验纽与对照组相比较，PBMC的TLR信号通路中的TLR4、TLR5、TLR6、IRAK4、TRAF6、TAKl、IKKa、JNK、P38、ERK、IRF5和NF．KB基因的mRNA表达明显增高(P<0．05)。同时通过Western—blot检测TRAF6、IRF5、NF．1(B和TAKI蛋白

3、的表达均有明显增高(P<0．05)。结论：PSP的免疫调控作用可能主要通过TLR通路中NF—KB矛DIRF5等转录因子调控终端效应因子的释放来实现。与此同时，TLR通路中关键节点基因TRAF6的激活，可能通过TAKl进一步激活MAPK途径，重庆医科大学硕士研究生学位论文影响细胞的周期、生长、凋亡和细胞因子的分泌，为进一步探讨PSP的免疫调节作用机理提供了实验依据。关键词：云芝糖肽；TLR；免疫调节；Q—PCR4重庆医科大学硕士研究生学位论文REGULAToRYEFFECTSoFPOIⅣSACCHAROPEPTIDE

4、SoNTLRSIGNALINGPATHNl7AYINHUMANPBMCABSTRACTObjective：TounderstandthemechanismofPSPonilmnunomodulationandanti-tumor,weexaminedthegeneexpressionsandrelatedproteinexpressionsonTLRsignalingpathwayinhumanperipheralbloodlnononuclearcells(PBMCs)Methods：ThehumanPBMCwa

5、sisolatedandculturedinvitroandthendividedintoPSPgroupandcontrolgroup，bothofwhichwereinducedbyPHA．RealtimefluorescentquantitativePCR(Q—PCR)andwestern—blotwereusedtoquantitativelyanalyzetheexpressionofthegenesofTLRsignalingpathwayinhulnanPBMCinducedbyPSPornot．Re

6、sults：Comparedwiththecontrolgroup，thegenelevelsofTLR4，TLR5，'T1'TL八Du／：，T儿D＼^AJVⅥA，"lPD八^AlIE·'u(，T1^Al＼I．．r11，Ti八Ifl＼TZu，、．，JT'lK、{T八T．-"，fTYJroO，LE'T心1T7，NF—KBandIRF5inthePSPgroupweresignificantlyhigherthantheseinthecontrolgroup(P

7、nofTRAF6，IRF5，NF—KBandTAKlwereobviouslyhigher(P<0．05)．Conclusions：PSPcouldplayaroleofilmnunomodulationbyregulatingtheexpressionsofNF—v．13andIRF5OiltheTLRinthePBMC，)andmightfurtheractivateMAPKwaystoinfluencethegrowthofcellsthesecretionofcytokinebytheactivationo

8、fTRAF6．ThesecouldsupplyevidencesforfurtherexploringtheilmnunoregulatorymechanismofPSP．Keywords：polysaccharopeptide；TLR；immunoregulation；Q。PCR6英文缩写CtDEPCDNAECLERKHRP麟IRAK4Ⅱ汪5胍KDMAPK