氧化胁迫下拟南芥根的蛋白质组学研究

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1、山东师范大学硕士学位论文氧化胁迫下拟南芥根的蛋白质组学研究姓名：庞小刚申请学位级别：硕士专业：发育生物学指导教师：赵彦修20060420出东帮蓖丈学颈士论文独创声明本人声明所呈蔹!的学位论文怒本人在导师指导下迸行的研究工作及取得的研究成祭。据我所知，除了文中特别加以标注秘致谢的地方终，论文中不包含其绝大已经发表或撰写过的研究戒采，也不包含为获得——(浪；如没有其他需要特别声明的，本栏可斑)或其他教肖机构的学位戚证书使用过的材辩。与我一目工作静阕悫对本磅突掰擞懿任侮贾漱愆已在论文中终了臻礁懿说暖并表示谢意。攀像数髂魏磊文

2、刚i，；堪窜。导瑟签字：，￡暑／学位

3、论文版权使用授权书本学位论文{乍者麓全了解堂燕有关僳甏、使用学位论文的规定，肖权保留并向圈家有关部门溅机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和俗阅。本人授权堂蕉可以埯学位论文的全部或部分内容绽又有关数据库遘行捡索，可以采用影印、缩印或搁疆等复锎手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后邋用本授权书)学位论文作者憝名：磊，1l签字强蠲：200f年6月1日'专。导师签字：{，‘熊字日期：200(年‘胃ifjm东师范大学硕士论文氧化胁迫下拟南芥根的蛋白质组学研究摘要植物学面临的一个巨大挑战就是要摘清楚植物面对环境的胁迫是如何做出一系裂反应豹，这些菠痘之

4、阉又有藿怎祥静关联。大蓬静磷究表窝，矫界环境酌胁迫，例如如干旱[1]、低温或高温[2，3]、高撩[4，5，6]、嚣养缺陷[7]、嶷氧[8】和紫外照射[9]等，都可以引起活性氧(R0s)产生的加蒯，造成氧化胁追[Io，11]。环境胁遮耐受性秘较为鸯效的攘氧铯絮绞露氧铯擐魏修复极镂呈垂檩关，戮荭骚究毒壹兹的抗氧化机制，利用生物技术手段提高植物抗逆能力有羹要的意义。在阻{圭瓣研究中入靠j犟§用不丽的方法研究生命俸中的基因、蛋白私通路，获得了很多重要的知识和规律，极大的推动了生物学的发展。随着臌基因鳃时代的到来和实验技术的发展，尤其怒新的生物学技术的应用以及雾种模

5、式生物垒基因组测序的竞或，傻褥大娥模的系绒的磋究蛋白震、磅究生鑫瑷袈残为霹能。予是蛋叁矮缝学成运而生。蛋白斌组学怒以蛋白质组为研究对象，对组织、细胞的整体蛋白进行检溺，包攒骚鑫覆袭这承平、氨鏊酸序列、翻译簸加工和蛋自穗鹣稆虿作角，在蛋白质水平上了解细胞各项功能、备秘生理、生化过程及疾瘸的病理过程蹲。蛋岛囊组学有两种研究策略。一种是高通量研究技术，把生物体内所有的蛋白质作为对象进行疆究，劳建立爨鑫质数据库，铁大惑模、系绞注爨焱度来羹绮蛋叁溪缍学，更符合骚白质缀学的本质。但是，由于剪切变异和翻译后修饰，蛋白质数爨极其庞大，且表达涟空间和时间不断交纯，所以分祈生

6、物俸内所有的蛋自菔是一个耗对费力，难以实现的耀想目标。另一静策略是研究不同状态或不阅时期细胞或组织蛋白质组成的变化，主强目标怒研究霄差异蛋白质及蕻功能，如正常组织与肿瘤组织问戆差筹蛋自鼷，寻找髓癌等疾痿撂{基穆著为冀诊凝治疗撬供依撂。在徽生耪、凌耪方面疆白质组学已缀取得了很大的研究成果，虽然在植物学方面还是刚刚起步，但是箕发展势头迅猛。研究羹点主要是利焉双向碾簸电泳和质谱来鉴定不同基因溅、不同发育阶段以及不同环境因子影响下蛋囱矮表达的羞努馈况及英相互作熙，舔虽已经取得一定成果。利用蛋白质组学研究手段更加系统地研究植物抗氧化的机制，山东师范大学硕士论文有利于

7、进一步弄清逆境响应基因和蛋白在整个防御网络中的协同作用。我们的研究工作旨在蛋白质组水平上了解拟南芥根的总蛋白在氧化胁迫后的变化情况。本实验分为两部分一是以拟南芥野生型空白和过氧化氢处理的根部组织为研究对象，采用蛋白质组学技术开展了拟南芥抵抗氧化胁迫差异蛋白质组学的初步研究，对比和分析了不同提取方法和不同电泳条件的实验效果，建立了分辨率高和重复性好的拟南芥根组织蛋白质双向凝胶电泳(2一DE)图谱，比较了两者之间蛋白质表达谱的差异，二是利用在线多维色谱质谱联用(onlineSCX—RPLC—MS／MS)技术平台，对nod—gel蛋白质组学研究和胶内酶解质谱鉴定

8、方法进行了必要的探索。不仅为拟南芥根部2一DE图谱数据库的建立提供了有益的数据资料，同时也摸索和完善了植物蛋白质进行在线多维色谱分离质谱联用技术(onlineSCX—RPLC—MS／MS)分析的实验条件和影响因素，为进一步的研究提供了新的思路和线索。关键词：拟南芥，根，蛋白质组学，双向电泳，质谱分类号：Q78山东师范大学硕士论文abstractAhugechallengetoplantres髓rchistounderstandhowtheplantsalerthimselffacingstressofenvironmentandtherelationamo

9、ngthenetworksthatunderlieplantstr