人胎脑神经干细胞的体外分离、培养与鉴定

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1、目录缩略词中英文对照表.....................................1中文摘要...............................................2英文摘要...............................................3论文正文人胎脑神经干细胞的体外分离、培养与鉴定前言...................................................5材料与方法......................................

2、.......8结果...................................................12讨论...................................................19结论...................................................27参考文献...............................................28附录.............................................

3、......33致谢...................................................34综述神经干细胞相关研究进展............................36参考文献...............................................41缩略词中英文对照表英文缩写英文全称中文全称NSCsneuralstemcells神经干细胞EGFepidermalgrowthfactor表皮生长因子bFGFbasicfibroblastgrowthfactor碱性成纤维生长因

4、子NGFnervegrowthfactor神经生长因子NSEneuronalspecificenolase神经元特异性烯醇化酶GFAPglialfibrillaryacidicprotein胶质纤维酸性蛋白PBSphosphatebufferedsaline磷酸盐缓冲液D-HanksDulbecco'sHanksbalancedsaltD-Hanks平衡盐溶液solutionDMEM/F12Dulbecco'smodifiedEaglemedium:Dulbecco改良的Eagle培nutrientmixtureF-12养基：营养混合物F-

5、12FITCfluoresceinisothiocyanate异硫氰酸荧光素CDclusterofdifferentiation分化抗原BrdU5-bromodeoxyuridine5-溴脱氧尿苷1人胎脑神经干细胞的体外分离、培养与鉴定中文摘要背景与目的：中枢神经系统的许多疾病，如脑和脊髓的损伤、脑出血、脑缺血性卒中、帕金森病、老年性痴呆病等都存在不同程度和方式的神经细胞缺失或变性死亡，并由此引起神经功能的损害。这些疾病所致的神经功能损害采用目前传统的治疗效果多不显著，神经干细胞的发现与移植研究进展为其治疗带来了新的思路和方法。本实验旨在探

6、索人胎脑神经干细胞的体外分离培养条件，从而在体外大量增殖神经干细胞；并观察神经干细胞增殖和分化的特点。方法：采用包含碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和表皮细胞生长因子(EGF)的无血清培养技术，从8-16周自愿水囊引产人胎脑皮质中分离出神经干细胞，并进行培养、传代、分化观察，应用免疫荧光细胞化学技术对培养的细胞及其分化的细胞进行鉴定结果：从8-16周人胎脑皮质中成功分离出具有自我更新和多分化潜能的神经干细胞，在无血清培养时细胞呈悬浮状态生长，形成神经球，该细胞具有连续增殖能力，可传代培养，表达神经巢蛋白抗原(Nestin)；在含血清培养时

7、诱导神经干细胞分化，分化后的细胞表达神经元细胞和胶质细胞的特异性抗原。结论：在含有EGF和bFGF的无血清培养液中，从人胎脑能分离培养出具有自我复制和分化潜能的神经干细胞，并能在体外扩增。这为在体外培养人胎脑神经干细胞提供了一种新的方法。关键词：胎脑/神经干细胞/细胞培养2Isolation,CultivationandIdentificationofHumanFetalNeuralStemCellsinVitroAbstractBackgroundandObjective:Manydiseasesofthecentralnervoussy

8、stem,suchasbrainandspinalcordinjury,cerebralhemorrhage,cerebralischemicstroke,Parkinson's