食管鳞癌中mir--183的表达水平及临床意义的初步研究

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1、温州医学院硕士学位论文食管鳞癌中miR--183的表达水平及临床意义的初步研究姓名：彭兵锋申请学位级别：硕士专业：肿瘤学指导教师：毛伟敏2012-05-17温州医学院硕士学位论文中文摘要食管鳞癌中miR-183的表达水平及临床意义的初步研究目的：研究食管鳞癌(ESCC)及癌旁正常的细胞或组织中miR-183的表达差异，探讨miR-183的表达差异与ESCC患者临床病理特征、TOP0II的表达状况及预后的相关性，从而评估miR-183的表达差异作为ESCC的转移及预后评估的指标的可行性，为ESCC患者的诊断及预后提供依据。方法：分别研究miR-183在3株人ESCC

2、细胞株(KYSE410、ECl及EC9706)及正常食管上皮中的表达差异。然后采用83例ESCC组织及相应癌旁正常组织，全部肿瘤组织均经病理诊断为鳞状细胞癌，病例来自于2009年2月至2010年9月份浙江省肿瘤医院胸外科食管癌患者手术后组织标本，癌旁正常组织取自肿瘤边缘5cmPt"区域，为肉眼下正常组织，上述组织切除后，快速用液氮冷冻并储存在．80。C冰箱中。按照RNA提取试剂盒说明书提取肿瘤组织及对应的正常组织的总RNA，紫外分光光度计测量判定所取总RNA的浓度和纯度，并于琼脂糖凝胶中进行电泳，测定RNA的完整性。然后按照逆转录试剂盒说明书进行cDNA的合成，然

3、后将所得cDNA进行实时定量荧光PCR扩增并制作扩增及溶解曲线，然后检测miR-183在ESCC组织及癌旁正常组织中的表达差异。应用免疫组化法检NESCC组织及癌旁正常组织中ToPoII的表达状况。结合临床病理资料及预后评估资料，利用统计软件SPSS17．0进行统计学分析。结果：相对于正常食管上皮细胞，miR．183在3个ESCC细胞株中高表达。在83对ESCC及癌旁正常组织中，51(61．4％)例ESCC组织中的miR．183相对于癌旁正常组织的高表达，24(28．9％)例无明显差异，8(9．6％)例低表达，miR-183在ESCC组织与癌旁正常食管组织中的表达

4、差异具有统计学意义(P<0．05)。无淋巴结转移的患者其ESCC组织中miR-183的高表达率为45％，有淋巴结转移的患者其ESCC组织中nliR．183高表达率为72％，两对比组之间的差异具有统计学意义(P=0．016)；miR．183的高表达与年龄、性别、分化程度、肿瘤位置、浸润程度、远处转移情况、TNM分期等均无统计学意义(P>O．05)。在51例lniR-183高表达的ESCC患者之中复发、转移或死亡人数为42(82．4％)，而32例非高表达的ESCC患者之中为15(46．9％)；Mir-183高表达的ESCC患者的中位生存时间为13个月，而与之相对应的m

5、iR．183非高表达的ESCC患者的中位生存时间为17个温州医学院硕士学位论文月。两对比组之间的差异具有统计学意义(P=O．016)。miR．183的高表达与淋巴结转移、远处转移一起作为ESCC患者预后的影响因素(P<0．05)。miR-183高表达的癌组织中TOP0II表达阳性。结论：miR-183在ESCC细胞及组织中高表达，miR．183的高表达与ESCC患者的转移及预后相关，而且，miR一183的高表达与淋巴结转移及远处转移一起作为ESCC患者预后的影响因子，miR一183高表达的癌组织中其TOPOII阳性表达率高，提示miR．183的高表达可能在ESCC

6、的发生发展过程中起促进作用。关键词：食管鳞癌；miR．183高表达；淋巴结转移；预后；TOPOII2温州医学院硕士学位论文ABSTRACTTheexpressionandclinicalsignificancerofmiR一183inesophagealcarcinomaObjective：TodetecttheexpressionofmiR-183andToPoIIinesophagealsquamous-celledcarcinoma(ESCC)anditsadjacentnormalcellortissuetoevaluatetheassociationbe

7、tweentheaberrantexpressionandclinicopathologicalfeatureinordertodiscussifmiR-183differentialexpressionasamarketforthetransferandprognosticevaluationornotinthefuturestudy．Methods：StudymiR。183expressiondifferencesinthethreeESCCcelllines(KYSE410，EC1，andinEC9706)andnormalesophagealepithel

8、ium．A