结缔组织生长因子在乳头状甲状腺癌中的表达及对其癌细胞特性的影响

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1、江苏大学硕士学位论文结缔组织生长因子在乳头状甲状腺癌中的表达及对其癌细胞特性的影响姓名：张清申请学位级别：硕士专业：外科学指导教师：张建新20120606江苏大学硕士学位论文结缔组织生长因子在乳头状甲状腺癌中的表达及对其癌细胞特性的影响中文摘要。目的：研究结缔组织生长因子在乳头状甲状腺癌中的表达情况，并分析结缔组织生长因子的表达高低与乳头状甲状腺癌临床病理指标的关系；研究结缔组织生长因子的表达对甲状腺癌细胞系生物学特性的影响。方法：选取20对乳头状甲状腺癌临床新鲜样本，利用免疫组织化学染色、蛋白免疫印迹、实时定量PCR检测结缔组织生长因子的表达情况

2、；选取72例乳头状甲状腺癌临床石蜡样本，利用免疫组织化学染色进行评分；分析结缔组织生长因子的表达与病人临床病理参数的关系，探讨结缔组织生长因子的表达对病人临床病理指标的影响；利用基因转染和基因沉默技术在乳头状甲状腺癌细胞系里上调及下调结缔组织生长因子的表达，建立稳定改变结缔组织生长因子表达的细胞株；在得到上调和下调结缔组织生长因子细胞株后，通过MTT、软琼脂克隆形成实验、流式细胞实验等检验甲状腺癌细胞系增殖、克隆形成能力、凋亡情况等生物学特点的变化；利用流式细胞实验检验甲状腺癌细胞上调结缔组织生长因子表达后，对r．干扰素诱导细胞凋亡作用的抵抗情况。

3、结果：与正常对照甲状腺组织相比，实时定量PcR检测结果表明在乳头状甲状腺癌中结缔组织生长因子高表达比例为75％；免疫组化和westernblot表明结缔组织生长因子在癌组织中高表达。对72例患者石蜡切片免疫组化染色结果进行统计分析，结果表明临床样本中结缔组织生长因子的表达水平与患者的性别、肿瘤大小、肿瘤分级以及肿瘤转移显著相关：在女性患者中结缔组织生长因子表达水平显著高于男性患者(p=O．000)；结缔组织生长因子的表达水平与肿瘤大小及肿瘤的病理分级是显著相关的(p=0．000)．在发生转移的肿瘤样本中，结缔组织生长因子的表达水平明显高于未发生转移

4、的肿瘤样本(p=0．011)。经westernblot鉴定，成功构建了上调结缔组织生长因子表达的BPH细胞株，命名为pCMV-ta92BCTGFl#和pCMV-ta92BCTGF2#；成功构建了下调结缔组织生长因子表达的结缔组织生长因子在乳头状甲状腺癌中的表达及对甲状腺癌细胞特性的影响BHP和TPC．1细胞株，分别命名为BHP或TPC．1CTGFsiRNA。MTT实验结果显示，pCMV-ta92BCTGFI#和pCMV-ta92BCTGF2撑细胞的增殖能力明显增强，与pCMV-ta92B细胞相比具有统计学意义(P<0．05)。而对于BHP或TPC．

5、1CTGFsiRNA细胞，同各自的对照组相比，增殖能力明显减弱(P

6、caspase．3和easpase．9的表达高于对照组细胞。用r-IFN处理后，pCMV-ta92BCTGFI#细胞的凋亡率明显低于pCMV-ta92B细胞(P

7、胞增殖；克隆形成；细胞凋亡中图分类号：R653II江苏大学硕士学位论文CTGFIsOver--expressedinPapillaryThyroidCarcinomaandPromotestheGrowthofPapillaryThyroidCancerCellsAbstractObjective：ToinvestigatetheexpressionofConnectivetissuegrowthfactor(CTGF)inpapillarythyroidcarcinoma(PTC)andstudythecorrelationbetweenthee

8、xpressionofCTGFandeliniepatholigiecharacteristicsinPTC；Tostud