何首乌饮对衰老大鼠睾丸组织no和inos含量及c-fos蛋白表达的影响

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1、河北医科大学硕士学位论文何首乌饮对衰老大鼠睾丸组织NO和iNOS含量及c--fos蛋白表达的影响姓名:李然申请学位级别:硕士专业:人体解剖与组织胚胎学指导教师:高福禄201203中文摘要何首乌饮对衰老大鼠睾丸组织NO和iNOS含量及c.10s蛋白表达的影响摘要随着医学及分子生物学的发展,延缓衰老成为国内外学者研究的热点课题之一。衰老与下丘脑.垂体.性腺轴的功能有着非常密切的相关,其中性腺起着重要调节的作用。传统医学认为肾虚是衰老的根本内因。补肾方剂何首乌饮具有补肝肾、健脾j益精血、延年益寿的功效。本研究采用D.半乳糖建立亚急性衰老雄性大鼠模型,探讨何首乌饮对衰老雄性大鼠睾丸

2、组织NO和iNOS含量及c-fos蛋白影响,为延缓睾丸衰老提供理论依据,为研发临床抗衰老中药积累实验资料。目的:观察何首乌饮对D.半乳糖所致亚急性衰老模型大鼠睾丸组织NO含量和iNOS活性的变化,睾丸组织c-fos表达和生精细胞凋亡的变化。方法:,1模型建立及分组:选用清洁级8周龄雄性SD大鼠60只,体重180~2209,在河北医科大学实验动物中心购买。将大鼠随机分为:模型组(M)、正常对照组(N)、何首乌饮延缓衰老组(HT)和何首乌饮预防组(i-w),每组15只。除正常组外,均采用6%D.半乳糖溶液(300mg·kg-1.d一,60d)连续腹腔注射建立亚急性衰老模型。在造

3、模的第60d,何首乌饮延缓衰老组给予何首乌饮4.8g/ml(1ml/1009)灌胃,模型组灌胃等量的生理盐水,何首乌饮预防组在腹腔注射D.半乳糖溶液的同时灌胃何首乌饮4.8g/ml(1ml/1009)。2标本处理(1)用10%水合氯醛麻醉大鼠,在内眦眶后静脉采取,血约1.5ml,离心取上清。放射免疫检测血清睾酮的含量,与正常组比较,睾酮含量下降显著后,认为模型建立成功。(2)每组取3只大鼠,用4%多聚甲醛液灌注固定,取睾丸组织,常规石蜡包埋,用于免疫组织化学染色和n胍L染色。(3)其余大鼠断头处死迅速取出双侧睾丸放入液氮中,采用生物化学方法检测睾丸组织NO和iNOS含量,W

4、esternBlot法检测大鼠睾丸c.fos蛋中文摘要白的表达情况。结果:1何首乌饮对睾丸组织NO和iNOS含量的影响模型组(M组)大鼠睾丸组织NO和iNOS的含量明显升高,与正常对照组(N组)大鼠比较差异具有统计学意义(尸

5、用药组凋亡阳性率显著低于模型组.(PO.05)。结论:l何首乌饮能够降低衰老大鼠睾丸组织NO和iNOS。2何首乌饮能够减少生精细胞的凋亡。3何首乌饮能够明显提高衰老大鼠睾丸c.fos蛋白的表达。关键词

6、:何首乌饮;衰老;睾丸;细胞凋亡;c.fos;NO;iNOS英文摘要EffectsofHeshouwuyinonthetestisNitricOxide,InducibleNitricOxideSynthaseandExpressionofc--fosproteinofagingmaleratsABSTRACTAnti—agingwiththedevelopmentofresearchtechniquebecomesoneofthemedicalresearchhotspot.Theregulationofhypothalamus-pituitary—gonadalaxis

7、iscloselyrelatedtoaging,inwhichgonadplayanimportantrole.Traditionalmedicineconsidersthefundamentalinternalcauseofagingisdeficiencyofthekidney.TonifyingkidneyprescriptionHeshouwuyincanencourageliversandkidneys,enrichblood,andprolongthelife.Inthisstudy,Weexplore

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