ppar--γ在增生性瘢痕中的表达及意义

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1、温州医学院硕士学位论文PPAR--γ在增生性瘢痕中的表达及意义姓名：张义鹏申请学位级别：硕士专业：外科学指导教师：高伟阳2012-05-27温州医学院硕士学位毕业论文PPAR-Y在增生性瘢痕中的表达及意义中文摘要目的研究过氧化物酶体增殖物激活受体一Y(peroxisomeproliferator—activatedreceptor—gamma，PPAR—Y)在人正常皮肤组织及增生性瘢痕组织中的表达情况及PPAR—y激动剂对体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞分泌细胞外基质的影响。讨论PPAR—Y在增生性瘢痕形成

2、过程中的作用，为进一步研究增生性瘢痕发病机制提供基础，并为增生性瘢痕的临床防治提供新的治疗靶点。方法1．临床采集正常皮肤组织标本1l例及增生性瘢痕组织标本15例，使用免疫组织化学法对正常皮肤组织和增生性瘢痕组织中PPAR—Y蛋白表达水平进行检测。2．临床采集正常皮肤组织及增生性瘢痕各9例，组织块法原代培养正常皮肤成纤维细胞及增生性瘢痕成纤维细胞。3．取正常皮肤组织和增生性瘢痕组织培养出来的的第三代成纤维细胞，应用细胞免疫化学技术检测细胞质和细胞核中的成纤维细胞特异性蛋白vimentin的表达，鉴定培养的成

3、纤维细胞。4．使用实时定量聚合酶链式反应技术及免疫蛋白印迹技术检测正常皮肤成纤维细胞及增生性瘢痕成纤维细胞中PPAR—V在mRNA水平及蛋白水平的表达量。5．使用MTT法检测PPAR-Y激动剂曲格列酮对成纤维细胞的增殖活性的影响。6．使用ELISA法检测TGF—p。及曲格列酮对增生性瘢痕成纤维细胞分泌I型胶原的影响。结果1．免疫组织化学正常皮肤组织和增生性瘢痕均有PPAR—Y蛋白的表达。表达主要分布于毛细血管的内皮细胞内和真皮层的成纤维细胞。统计结果分析显示PPAR—V在增生性瘢痕组织(28．39±6．1

4、2)中较正常皮肤组织(59．24±10．35)中表达低，(P

5、酶链式反应技术PPAR—YmRNA在正常皮肤成纤维细胞和增生性瘢痕成纤维细胞中均有表达。正常皮肤成纤维细胞中PPAR—YmRNA相对表达量为14．62％士2．92％，增生性瘢痕成纤维细胞中PPAR—YmRNA的相对表达量为7．08％士3．04％，增生性瘢痕组PPAR—YmRNA水平相对表达量显著低于正常皮肤成纤维细胞，(P

6、48％士4．13％，增生性瘢痕组为9．40％士2．23％。正常成纤维细胞PPAR—Y蛋白水平的相对表达量显著高于增生性瘢痕组，(PO．05)；各实验组组间比较，差异也无统计学意义(P>0．05)。7．ELISATGF—p。组(5ng／m1、lOng／ml、20ng／ml、50ng／m1)能够增加增生性瘢痕成纤维细胞胶原1分

7、泌量，并呈剂量依赖效应，(PO．05)。结论1．PPAR—Y在正常皮肤和增生性瘢痕中均有表达，且增生性瘢痕中PPAR—Y表达较正常皮肤低。2．TGF—13。干预培养增生性瘢痕成纤维细胞能够增加其I型胶原分泌量。3．PPAR—Y激动剂干预培养增生性瘢痕成纤维细胞对其I型胶原分泌量无明显影响。4．PPAR—Y激动

8、剂能够拮抗TGF-p。诱导的增生性瘢痕成纤维细胞I型胶原分泌增多效应。5．PPAR—Y可能参与了增生性瘢痕纤维化的形成过程，为今后病理性瘢痕形成机制的研究提供新的思路，并为该病的临床有效治疗提供了一定的实验依据。关键词成纤维细胞；细胞培养；PPAR—Y；增生性瘢痕4TheExpressionandSignificanceofPPAR-YinHypertrophicScarABSTRACTObjectiveThisstudywa