at1、at2、mas和ace2在子宫内膜息肉表达及意义

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1、河北医科大学硕士学位论文AT1、AT2、Mas和ACE2在子宫内膜息肉表达及意义姓名：江巍申请学位级别：硕士专业：病理学与病理生理学指导教师：张杰英；马毓梅201203中文摘要ATl、AT2、Mas和ACE2在子宫内膜息肉表达及意义摘要子宫内膜息肉(Endometrialpolyps，EP)是妇科常见的宫腔内良性病变，由分布不规则的腺体和间质组成。其发生机制不详，f临床表现不特异，治疗方法单一，手术切除后易复发，并有癌变可能。肾素．血管紧张素系统(renin．angiotensinsystem，RAS)是人体重要的体液调节系统。传统观点认为循环系统中的肾素主要来自肾脏，后证实在多种器官

2、组织中存在相对独立的局部RAS。局部RAS通过两条作用相反的代谢轴ACE．AnglI．ATl／AT2和ACE2．Ang(1．7)一Mas轴发挥作用。血管紧张素II(angiotensinII，AnglI)、Ang．(1—7)、血管紧张素II受体l亚型(AngIItype1receptor，ATl)、血管紧张素II受体2亚型(AngIItype2receptor，AT2)、Mas受体和血管紧张素转化酶2(angiotensin．convertingenzyme2，ACE2)均为R．AS主要成员。ATl、AT2均为AnglI的受体，Mas为Ang一(1—7)的受体，ACE2主要作用是水解A

3、nglI，使之转化为Ang一(1—7)，起到连接两个代谢轴的桥梁作用。近年来大量研究证实，在心脏、肝和肺脏的纤维化病变中，局部RAS激活，通过多种途径参与器官纤维化的发生。在正常子宫内膜局部也存在R_AS，参与调节子宫内膜周期性的增生与脱落。EP组织学最具特征的是厚壁且常扩张的血管及纤维性间质。EP的发生是否与子宫内膜局部RAS异常有关，尚未见相关报道，值得进一步探讨。目的：通过观察RAS中ATl、AT2、Mas、ACE2在EP组织中蛋白及mRNA水平表达情况，探讨EP的发生机制，为EP的临床治疗提供理论依据。方法：1研究对象选取病例均来自河北医科大学第二医院。I临床资料完整，年龄20

4、"---40岁。3个月内均未服用任何甾体类激素并除外其他任何子宫病变者，对照组均选自因输卵管性不孕行诊刮的患者子宫内膜。中文摘要免疫组织化学标本选自病理科2009年1月至2012年1月间存档蜡块。实验组50例EP；对照组包括22例正常增殖期子宫内膜和15例分泌期子宫内膜。实时荧光定量反转录PCR(Real．TimeReverseTranscriptionPCR，Real．TimeRT．PCR)标本选自2010年3月至2012年1月间，在月经干净后1周内，行宫腔镜检查，直视下电切新鲜标本，并经病理证实EP者24例作为实验组。对照组包括10例正常增殖期子宫内膜和5例正常分泌期子宫内膜新鲜标

5、本。所有新鲜标本均在离体后迅速放入液氮中，30min内移至．80℃冰箱冻存。2免疫组织化学：采用SP法，DAB显色、苏木素复染。3实时荧光定量反转录PCR(Real．TimeRT．PCR)新鲜标本Trizol一步法提取细胞总RNA。2％琼脂糖电泳鉴定完整性。提取的总RNA在反转录酶作用下42。C50min，95。C5min反转录合成cDNA。将cDNA、2xMasterMix和目的基因引物构建PCR反应体系，在荧光定量PCR仪7300RealTimePCRSystem中，95。ClOmin，1个循环，95℃15s，60℃20s，72。C27s，40个循环行PCR扩增。扩增完毕后，通过计

6、算机进入SDSV1．3软件结果分析界面，设置基线为第3．15个循环，GAPDH为内参照基因，设置对照组的第l号样品为标准1，得到各样本各目的基因的Ct值，再按照公式RQ=2“比‘计算各目的基因表达的相对定量值(RQ值)，即反应各目的基因mRNA的相对表达量，将RQ值进行统计分析。4统计分析实验数据采用Kolmogorov．Smimov法进行正态性检验，采用LeveneStatistic法进行方差齐性检验，并应用Chi．squaretest和Wilcoxon秩和检验等，用SPSSl3．O统计软件进行统计，P值<0．05时，认为具有统计学意义。结果：1免疫组织化学染色结果1．1ATl的表达

7、ATl阳性表达定位于细胞膜和胞浆。对照组子宫内膜腺上皮和血管内皮ATl呈阳性表达，并在月经周期的不同阶段染色强度不同；染色强度中文摘要从增殖早到增殖晚期逐渐增强，至黄体期逐渐减弱。内膜间质和肌层无ATl表达。EP组织ATl的表达较对照组相比，染色部位仍位于子宫内膜腺上皮和血管内皮，但染色强度不均匀、紊乱。具体表现在每例EP组织内围绕厚壁血管周围的腺体，腺上皮ATl着色强弱不等，较对照组增殖期相比，呈明显灶性增强、减弱，因此不具有统计学意义(P>