海洋微藻分类方法学的研究论文

《海洋微藻分类方法学的研究论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、～1；0lt、；．，I＼＼llIIIlIIllIIIIIIIlllllllllllY2159606海洋微藻的分类方法学研究学位论文完成日期指导教师签字答辩委员会成员签字萋]击筹妊雾．一．‘独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含末获得或其他教育机构的学位或证书使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。兰竺兰兰生苎兰兰!盔iI兰兰里塑：!!!!兰苎!!!学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关傈

2、留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复目1件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权学校可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》．并通过网络向社会公众提供信息服务。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名利、导师签字签字日期：》忆年S月弘日签字日期：z0伊，月砂日海洋微藻的分类方法学研究摘要海洋微藻是海洋生态系统中的初级生产者，也是重要的海洋生物资源。海洋微藻遍布全球海洋的每一部分，种类多、数量大、繁殖快。海洋微藻

3、的很多种类具有很高的经济价值，在海洋生态系统的物质和能量的循环中起着极其重要的作用。海洋微藻的分类是微藻各项研究的基础，从19世纪以来．微藻的鉴定方法经历了从形态学鉴定、生理生化鉴定到分子生物学鉴定的发展，但每种方法都有局限性。对海洋微藻的分类还没有达到对高等动植物分类的水平，例如生殖隔离和生殖方式尚未应用于海洋微藻的分类中。本研究首先在分子生物学和形态学两方面探讨了对不同海洋微藻的分类方法，然后在微藻生殖方式研究方面进行了探索：1本研究通过单细胞把对保存的海洋微藻样品的分子信息和形态信息联系起来。针对长度大于20微米的海洋微藻，本研究利用单细胞PCR方法，调查了40种以微藻为主的中国南海的小

4、型浮游生物的18SrRNA基因信息，并使之与其形态相对应。最终结果显示，利用这种形态与分子生物学信息结合的办法，可以把分离得到的小型浮游生物(主要是微藻)鉴定到属的水平。研究中，我们提出了绕过海洋微藻培养，用分子生物学进行鉴定的新方法。2本研究选择微拟球藻作为典型，研究利用分子生物学方法把微藻鉴定水平提高到种的方法。由于微拟球藻属是一种小型、简单，并在全世界范围广泛分布的生物，属于真眼点藻纲。这一属中的物种常常在近海被发现，它们大小通常为2-5微米。微拟球藻通常被认为是微小型浮游生物。我们利用平板法分离得到了一株微拟球藻，提取其DNA，扩增井测序得到18SrRNA基因，帕吐基因和核糖体转录单元

5、的ITS区域序列，然后构建邻接法(neighborjoining)(Tamura—Nei距离转化模型)和撮大简约(maximumparsimony)算法系统发育树分析其在微拟球藻属内分类关系。结果证明这一株微拟球藻为Nannochloropsisoceanica，表明18SrRNA基因，巾吐基因和ITS区域序列三种搿洋微藻的分类方挂学目究序列联合使用可以成功将微拟球藻鉴定到种的水平。3微藻传统的分类方法很少考虑生殖方式。生殖是微藻生活史的重要阶段，影响着微藻物种的稳定性．这是分类的重要依据。本研究利用IlluminaGA测序技术对微拟球藻(ⅣoceanicaSSudaetMiyashita)的

6、全基因组进行测序，揭示了微拟球藻的无性生殖方式。本研究显示微拟球藻的基因组约30Mb，含有11，129个编码蛋白的基因。Ⅳoceanica的多态性核苷酸的低频率以及与1：1(major：minor，minor->10)期望值的偏离，揭示了Moceanica的核单倍性。而缺少主要减数分裂相关特异蛋白编码基因则证明了微拟球藻(Ⅳ_ocea"ica)的生殖方式为无性生殖。4硅藻的有性生殖的类别反映了硅藻进化中的重要变化，这也是微藻形态学分类的一个重要根据，也可以解决海洋微藻在培养过程中形态变化造成的形态鉴定困难。三角褐指藻是一种针晶羽纹硅藻，被广泛用作生物化学和生理学的研究材料，全世界三角褐指藻都属

7、于一种，分子生物学分类的研究己开展过，但关于它的有性生殖还从未在形态上被发现过，有性生殖方式还未被描述过。三角褐指藻具备三种形态且可以相互转化，对其生殖方式的观察有助于揭示单纯对其某一种形态的观察所不能揭示的进化位置问题。在本研究中，我们观察到了三角褐指藻细胞核在细胞之间的转移：发现了两个细胞配对，有时配对的两个细胞其中一个的细胞核转移到另一个细胞中。细胞的配对起始于两个细胞在其细胞臂顶端处铰合，