水稻ossidp407基因和osnlrp5基因的功能研究

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1、厦门大学硕士学位论文水稻OsSIDP407基因和OsNLRP5基因的功能研究姓名：王焕乐申请学位级别：硕士专业：发育生物学指导教师：陈亮2012厦门大学硕士论文2012摘要植物在应对自然环境中的各种生物与非生物的胁迫反应调控中涉及到多种复杂的信号传导途径包括各种蛋白间和蛋白与其它小分子的相互作用：在研究水稻应对生物胁迫的分子机理过程中，通过分析细条菌侵染水稻植株差异表达的蛋白，我们分离了两个与水稻抗病反应相关基因，一个是编码删一，如蛋白的仇舭剐町基因；另一个是DUFl644基因家族，编码I斟G／U．box蛋白的仍瓯DP卯7限I】0，z：RF2)基因。本研究对这两个基因的功能开展了

2、相关研究工作。仍删卯7基因位于水稻第2号染色体上，含有1个内含子和2个外显子，全长3．21Kb，包含一个1086bp的开放阅读框，编码362个氨基酸的蛋白，该蛋白含有一个高度保守的对NG／U．Box结构域和DUFl644结构域。Q．PCR结果表明：茉莉酸甲酯(MeJA)，水杨酸(SA)，赤霉素(GA)和脱落酸(ABA)等抗病信号分子能诱导仍删幻7的表达；另外，NaCl和PEG也能诱导仍删4D7的表达，在水稻与细条菌的互作反应中侥御卯7表现出明显的上调表达。为了进一步研究伪＆D尸4D7在水稻抗病反应中的功能，我们通过农杆菌介导的水稻遗传转化技术将仍龇DM7基因整合到水稻的染色体上；

3、Q．PCR分析筛选到3株目的基因的表达水平明显高于野生型(达100．200倍)的过量表达植株和3株表达水平明显低于野生型(最低可达0．1倍)的抑制表达植株；对转基因植株进行接菌(细条茵)实验，发现过量表达植株的抗性明显增强，而抑制表达植株的抗性相对降低，且在过量表达抗性增强的植株中，水稻防御相关M破er基因，倥4、艘5和尸次J『p上调表达。这些结果表明，仍僦D：ⅣD7基因可能参与到与细条菌的免疫反应中。伽剐町基因位于水稻第5号染色体上，由1个外显子组成，全长为282lbp，包含一个1941bp的ORF，编码647个氨基酸的蛋白，属于NBS．LRR类蛋白，含有NB．√6眦和LI汛结

4、构域。伽剧巧基因在水稻中的表达具有组织特异性：在幼根、叶和叶鞘中表达量高，而在茎中较低。Q．PCR分析表明，H202、ABA、SA和MeJA等抗病信号分子能诱导呲即5基因的表达，在水稻与细条菌的互作中删兄阿基因被抑制表达，通过水稻遗传转化技术获得104棵过量表达转一基因植株；Q．PCR结果表明在随机挑选的8株过量植株中有2株的僦即5基厦门大学硕士论文2012因的表达水平达到50倍以上，在购买的呲尉町基因的突变体植株中有3株的表达水平低于0．5倍。在伽剐百基因的过量转基因或突变体植株中防御相关Marker基因尸R彳、徘5、j慢JD、jv：2哩J和尉rⅣ事．，而诒基因都被不同程度的上

5、调或下调表达。这些结果表明，呲剧町基因编码的NBS．LI汛类蛋白在水稻的抗病反应网络中发挥作用。关键字：水稻；抗病；细条菌U厦门大学硕士论文2012AbstractWh肌plaIltsre‘’poIlsetobotllbiotic觚dabitotics仃essesinthen删envir0Inent，regulationofmanydef-ensere啪Ilsesrequirescornplicatedsi91lalingpathwaynetwotkS，includingillteratiollsbeteweenprotei璐orbetweenproteins锄dothersma

6、llmolecules．Duringt量le咖diesofmoleculemechallisma．bouttllericede矗mceinducedby肠胛肪D，，zD麟删p哏卿z记D肠∞∥，twodi脑entiallyexpressedproteillsC蝌己尉町锄d仇聊卯7、№reiS0lateda11didentified弱de缅ce-relatedCW忆剐町maybeagenecodingfor尉M一以勋proteiIls，and仍瓯DP卯7ge眦，amemberofDUF1644矗珊ily，encodesⅪNG／U-boxprote沁．hlt11isstudy，tlle

7、biolo西calmndionsofthesetwogeneswereaI】lalyzed．仍毗DP卯7islocatIedonchromosome2ofthericegenomeandconsistsofomiIl仃on锄d押oexons．The龟ll-lengthof眈?皿D尸铀7is3．2lkbw曲肌openreadiIlg妇ne(ORF)ofl086bp，矾恤chencodesa362锄in0acidprote洫．T11isproteincontainsconsen，ed