扶桑绵粉蚧共生微生物的分子鉴定及分析

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1、万方数据DissertationforMasterMoleculeidentificationandanalyseofthesymbiont‘g‘’mealybug(Phena‘soleno7sismlcrooralllSminmealyBug(rtlenacoccussotenopsts2Tinsley)AinZoologyUndertheSupervisionofAssociateProfessorYongmingRuanByZhenjieWangZhejiangNormalUniversityJinhua，Zhejiang，ChinaMay,201

2、4燃㈣万方数据扶桑绵粉蚧共生微生物的分子鉴定及分析摘要扶桑绵粉蚧(PhenacoecussolenopsisTinsley)，隶属于半翅目(Hemiptera)、蚧总科(Coecoidea)、粉蚧科(Pseudocoecidae)、绵粉蚧亚科(Phenacoecinae)、绵粉蚧属(Phenacoccus)，该害虫于1898年在美国被首次报道，近百年来一直被认为是棉花的次要害虫。自从2008年扶桑绵粉蚧相继入侵印度、巴基斯坦和中国棉区之后，已由刚入侵时的次要害虫转变为这些地区的主要害虫，对作物以及一些观赏性植物危害较大，常造成寄主植物的大面积减产甚至死亡

3、，对农业造成的巨大经济损失使得该害虫成为了研究热点。该昆虫为刺吸式口器昆虫，取食植物韧皮部汁液，体内外含有丰富多样的共生微生物，包括共生细菌和共生真菌。扶桑绵粉蚧中的原生共生细菌为其提供的必需氨基酸，是其生存繁殖不可或缺的，而一些次生共生细菌虽然不是寄主所必须的，但对寄主的适应性、对天敌的抵抗力以及与其他昆虫竞争等方面具有重要作用。目前对该害虫的防治多为化学防治措施，这必然造成环境污染、生物多样性破坏和扶桑绵粉蚧抗药性的产生等诸多问题。而真菌作为一种环境友好的生物防治方法，越来越受到人们的关注。本研究通过在IlluminaMiSeq平台分析测序细菌16S

4、rDNAV4区序列，分析了扶桑绵粉蚧中的共生细菌多样性，同时通过传统氯霉素培养基分离法分离得到了5株扶桑绵粉蚧虫生真菌。结果如下：(1)16SrDNA测序分析表明，扶桑绵粉蚧中的共生细菌丰富多样，主要为一些变形菌fq(Proteobacteria)、厚壁菌f](Firmicutes)和拟杆菌f-](Bacteroidetesl类共生细菌。在门水平上，在雌雄粉蚧中都占主要地位的变形菌门共生细菌差异不显著，而其它一些门类的则表现为差异显著。在属水平上，大部分的共生细菌在雌雄粉蚧中都表现为差异显著。(2)分析显示Ascomycota．spstrainE-Ymi

5、ngR对扶桑绵粉蚧的侵染最高，达66．67％，Colletotrichumgloeosporioidesstra2nI-YmingR则表现为最低，只占3．33％。多重感染统计分析表明，扶桑绵粉蚧中倾向于同时感染多种真菌，但也1万方数据不是多多益善。可能是由于各真菌问存在相互作用，从而使其在粉蚧上达到一个动态平衡。关键词：扶桑绵粉蚧；共生细菌；虫生真菌；多样性；侵染率：多重感染；动态平衡II万方数据Moleculeidentificationandanalyseofthesymbiontinrnealybug(PhenacoccussolenopsisTi

6、nsley)AbstractThecoaonmealybugPhenacoccussolenopsis(Tinsley)(I-Iemiptera：Pseudo·-coccidae)wasdescribedoriginallyfromtheUSAin1898．Itremainsasaminorpestfornearlyonehundredyears．PhenacoccussolenopsishasemergedasmajorpestofcottonsinceitinvadedIndia，PakistanandChina．Thisexoticmealybug

7、causedhugeeconomiclossandhasbeenthecurrenttopicofresearch．Thispestisasapsuckinginsectandrelyonthephloemsapoftheplant．Therearemanykindsofmicroorganisminvitroandvivo，includingsymbioticbacteriaandfungi．TheprimarysymbiontprovideessentialaminoacidstothiSpestwhichareobbligatotomaintain

8、its’normallife．Thesecondarysymbiontwhich