怀菊花染色体加倍植株的诱导及生物学特性研究

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1、CHROMOSOM匝DOUBLINGPLANT肿UCTIONANDBIoLoGYCHARACTERISTICSRESEARCHONHUAIQINGCHRYSANTHEMUMADissertationSubmittedtotheGraduateSchoolofHenanNormalUniversityinPartialFulfillmentoft．heRequirementsfortheDegreeofMasterofScienceBySupervisor：Prof．LiMingdunAssociateProfessorZhaoXitingMay2014摘要本研究以怀白菊[Humqmgch

2、rysanthemum(Chrysanthemum，，z胛ifolium)CV．Huaibaiju]为实验材料，首次建立了怀菊花染色体加倍植株的诱导技术体系，并对怀菊花加倍植株的生物学特性进行了研究。研究结果如下：1．怀菊花染色体加倍技术体系的建立。以秋水仙素为试剂i采用浸泡法和培养基中添加法处理怀菊花带芽茎段，诱导怀菊花染色体加倍植株，确定了浸泡法的最佳处理方式为O．05％的秋水仙素浸泡9h，诱导率为25％；培养基中添加法的最佳处理方式为0．050A秋水仙素处理7d，诱导率为20％。2．从形态学、解剖学、细胞学及分子水平鉴定了诱导后的怀菊花变异植株，获得了染色体加倍植株。与未加倍植株(

3、对照植株)相比，形态上，怀菊花染色体加倍植株生长延缓，叶片变大增厚；解剖学上，气孔密度减少44．1％，保卫细胞的长和宽分别增加34．2％、31．9％；细胞学上，染色体数目增加一倍，为90条；分子水平上，细胞中的DNA含量增加了一倍。‘3．确定了怀菊花染色体加倍植株的同工酶酶谱特征。与对照植株相比，加倍植株的POD同工酶多了2条带，SOD同工酶多了一条带，且谱带亮度明显较亮。4．染色体加倍后提高了怀菊花的低温耐性。在10。C／5℃(昼／夜)低温胁迫下，与对照植株相比，染色体加倍植株的相对电导率和MDA含量较低，脯氨酸含量、叶绿素含量、可溶性蛋白质含量、POD、SOD和CAT活力较高。5．染

4、色体加倍后增强了怀菊花的大田适应性(1)农艺性状。与对照植株相比，染色体加倍植株的冠幅、茎粗、最大叶片长、叶宽较大，而株高、平均节间距和叶形指数较小：(2)生理特性。与对照植株相比，染色体加倍植株的叶绿素含量、可溶性糖含量、可溶性蛋白质含量、POD和SOD活性较高；(3)产量和品质。对照植株相比，染色体加倍的D1株系和D2株系的单株花鲜重分别增加了48．0％和50．o％，绿原酸含量分别增加36．3％和42．8％，木犀草苷含量分别增加80．5％和73．5％。关键词：怀菊花，染色体加倍，诱导，生物学特性IIABSTRACTTheHuaiqingchrysanthemum(Huaibaiju)

5、wasusedasexperimentalmaterialsinthisstudy．Thetechniquesystemaboutinducingc11romosomedoublingplantsofHuaichrysanthemumwasestablished，and．ithadbeenstudiedthebiologicalcharacteristicsofchromosomedoublingplants．TheresultswereaSfollowing：1．Establishedthetechniquesystemaboutinducingchromosomedoublingpl

6、antsofHuaichrysanthemum．ChromosomedoublingplantsofHuaichrysanthemumwereinducedthroughthemethodsofsoakingwithcolchicineandmediumaddingcolchicinewithbudstemsection．TheoptimalconcentrationandtimecombinationofthepreviousmethodWasconfirmed，itWas0．05％、9h，theinductionratebeing25％；andthelattermethodwas0．

7、05％、7d，theinductionratebeing20％．2．IdentifiedtheHuaichrysanthemummutantsafterinductionfromthelevelofmorphology,anatomy，cytologyandmolecular,andthecllromosomedoublingplantswereobtained．Comparedwiththecontrolplants，morpho