小麦hmw-gs鉴定及部分农艺性状基因分子标记验证分析

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1、Athesis(dissertation)submittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterIdentificationofHNⅣnGSandVerificationofseveraltraitbymolecularmarkersinWheatBy：HuZhengSupervisor：JiaoZhenBiophysicsPhysicalEngineeringCollegeApril2014本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不

2、包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者：嘲良日期：上研中年F月砷日I本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本^授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术

3、论文或成果时，第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。学位论文作者：胡璐L日期：印蚪年彳日摘要小麦是世界主要粮食作物，亦是我国第二大粮食作物，培育高产、优质、多抗的小麦新品种始终是育种家的目标。HMW-GS是麦类作物储藏蛋白中的重要组成部分，对小麦加工品质有重要影响。本研究通过对59份河南省主要栽培品种(系)及后代进行了HMW-GS的SDS．PAGE鉴定，共检测到12种亚基和20种亚基组成。共46个小麦品种包含优质亚基，在Glu—A1位点优质亚基组合比例高于全国平均水平，而Glu．B1、Glu-D1位点优质亚基组合比例低于全国平均水平

4、。仅有4个品种含有评分最高的组合“J出J，取7地)，8，1DxS+lDylO”。因此在河南小麦品质育种中，应注重利用含有不同位点优质亚基的亲本材料配制杂交组合，从而选育出优质亚基聚合体，改良小麦的亚基组成，提高小麦品质。本文在使用SDS．PAGE分析上述小麦材料时，还发现其中存在着大量(25．42％)与1Dx5亚基SDS—PAGE电泳谱带相似的条带。这些过去被认为是1Dx5亚基(如温6)的储藏蛋白与IDx5亚基极其相近，在SDS．PAGE中的迁移率略快于1Dx5亚基。经过Dx5分子标记检测以及SNP多态性引物Dx*检测，证实这类亚基不同于1Dx5亚基，

5、对其序列信息分析后发现与AegilopstauschiiHMW"Dtx2等位基因、Triticumaestivum株系SQ．884、SQ．188、SQ一783、SQ一180、SQ一659高分子量麦谷蛋白亚基Dtx5等位基因相似程度为100％，与小麦1Dx5亚基对应基因相似程度为99％。同时实验使用的Dx*引物可以作为Dx5分子标记的阴性对照使用，排除由于实验错误导致的假阴性，提高分子标记检测的准确性。本文还对小麦品种偃展99(98)lAy假基因完全序列进行了克隆测序，与NCBI数据库相关信息比对发现，其与二倍体、四倍体小麦品种lAy假基因有极近的亲缘关

6、系。分子标记辅助选择是对传统育种方式的有效补充。传统的育种主要依赖于植株的表现型选择。对植株抗病性、品质、产量等性状的选择、鉴定工作十分困难。而利用分子标记进行MAS育种不仅可以通过与目标基因紧密连锁的分子标记在早世代对目的性状进行选择，同时，也可以利用分子标记对轮回亲本的背景进行选择。因此，建立高效、经济、准确的分子标记检测平台将为推广分子标记辅助选择技术起到重要作用。本文通过搜集对照材料、优化PCR反应条T摘要件，建立了包含小麦品质、抗性的26个质量性状分子标记筛选平台。应用该平台对59份河南省小麦主要栽培品种(系)的相关性状基因进行分子标记检测，

7、获得了较为满意的结果，为后续分子标记辅助选择工作的推广应用提供了参考。同时在实验过程中改进了(非)变性聚丙烯酰胺凝胶电泳方法的一些细节，提高了分子标记筛选的效率。关键词：高分子量麦谷蛋白亚基(HMW-GS)，眈5亚基J砂基因分子标记抗病性IIAbstractWheatisoneofthemostimportantstaplefoodsallaroundworld,isalsothesecond-largestcorpsin0111"country．Improvingyield,qualityandresistanceofwheatisthegoalso

8、fwheatbreeding．HMW-GSsareimportantcomponentsofs