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时间:2019-02-27
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1、Chapter1绪论一、什么叫分子生物学?分子生物学是研究核酸、蛋白质等生物大分子的结构与功能,并从分子水平上阐述蛋白质与核酸、蛋白质与蛋白质之间相互作用的关系及其基因表达调控机制的学科,是人类从分子水平上真正揭开生物世界的奥秘,由被动地适应自然界向主动地改造和重组自然界的基础学科。二、简述分子生物学的发展历程?1、人类对DNA和遗传信息传递的认识阶段Ø1944年,著名的微生物学家Avery等在对肺炎双球菌的转化实验中证实了DNA是生物的遗传物质。Ø1950年,Chargaff提出了碱基配对的Chargaff规则。Ø
2、1953年,Watson和Crick发现了DNA双螺旋模型。Ø1961年,Nirenberg等破译了第一批遗传密码,Crick在前人的基础上提出中心学说。Ø1961年,F.Jacob和J.Monod在巴斯德研究所的工作,证实了操纵子学说。2、重组DNA技术的建立和发展阶段Ø1967年,Gellert发现了DNA连接酶。Ø1970年,Smith和Wilcox等分离到第一种限制性内切酶。Ø1972~1973年,H.Boyer和P.Berg等发展了重组DNA技术,并完成了第一个细菌基因的克隆。Ø1975年,Southern
3、发明了SouthernBlot。Ø1975~1977,Sanger、Maxam和Gilbert发明了DNA测序技术。3、重组DNA技术的应用和分子生物学的迅猛发展阶段Ø1985年,Saiki等发明了聚合酶链式反应(PCR)。Ø1990年,人类基因组计划全面正式启动。Ø2001年,Nature和Science同时发表人类基因组序列,2003年,中国、美国、日本、英国、法国和俄罗斯六国科学家,同时宣布人类基因组计划的完成。综上不难看出,二十世纪以核酸研究为核心,带动着分子生物学向纵向发展:五十年代的双螺旋结构;六十年代的
4、操纵子学说;七十年代的DNA重组;八十年代的PCR技术;九十年代的DNA测序都是分子生物学发展的里程碑,将生命科学带向一个由宏观到微观,再到宏观的时代。三、什么叫反向生物学?反向生物学是指利用重组DNA技术和离体定向诱变的方法研究已知结构的基因相应的功能。Chapter4基因与基因组的结构4.1基因的概念一、三个名词:基因、顺反子、突变子•基因是原核、真核生物以及病毒的DNA和RNA分子中具有遗传效应的核苷酸序列,是遗传的基本单位和突变单位以及控制性状的功能单位。•反式构型中,不能互补的各个突变位点在染色体上所占的一
5、个区域称为一个顺反子,顺反子是一个具有正常生理功能的遗传物质的最小单位,实际上,它是基因的同义词,是一个功能水平上的基因。•突变子指一个顺反子内部能发生突变的最小单位,一个突变子可以小到只有一对碱基。二、一句话:基因分为编码蛋白质、rRNA、tRNA的结构基因,以及具有调节控制作用的调控基因;一个完整的基因由编码区和调控区这两部分组成,编码区的产物可游离扩散,因而是反式作用的,调控区是不形成表达产物的DNA序列,起着对与之连锁的编码区进行调节控制的作用,因此是顺式作用的。4.2基因组1.基因组指生物体或细胞中,一套完
6、整单体的遗传物质的总和。如:原核生物染色体、质粒,真核生物的单倍染色组、细胞器,病毒等所包含的一整套基因,以及包括基因与基因之间区域的所有DNA。2.C值悖理:生物单倍体基因组所包含的全部DNA量称作物种的C值,随着生物的进化,生物体的结构与功能越来越复杂,其C值也越来越大,但是真核生物中DNA的含量却与这一原则相悖,具体表现在①C值不随生物的进化程度和复杂性而增加;②关系密切的生物C值相差甚大;③真核生物DNA的量远大于编码蛋白质等物质所需的量。这一现象,称作C值悖理。4.3病毒基因组一、病毒基因组的特点•基因组小
7、,所含遗传信息少。•可以由DNA或RNA组成,但每种病毒只含一种核酸。•基因有重叠现象:同一段DNA序列可以编码2种或2种以上的蛋白质。•基因间隔序列短。•功能基因簇和多顺反子mRNA•有部分真核生物基因的特性。二、一句话•病毒的核酸有正链和负链之分:正链RNA,即病毒的单链RNA基因组可直接作为mRNA,对动物细胞具有感染性;而负链RNA则以与之互补的RNA链作为mRNA,转录时需要依赖RNA的RNA聚合酶,这种聚合酶由病毒颗粒携带,所以其本身对动物细胞不具感染性,需要转录成mRNA才有感染性。三、反转录病毒基因结
8、构图(记住大概)反转录病毒基因排列顺序最典型的结构为5’LTR-gag-pol-env-3’LTR;其中LTR为长片段重复序列,gag-pol-env为病毒复制必须的基因。四、几个典型病毒ØΦX174噬菌体基因组的重叠基因;我们将这种不同基因公用一段核苷酸序列,按照不同的可读框进行转录的现象称为基因的重叠,重叠的基因叫做重叠基因。ØSV40病毒
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