基地栀子优良种质的筛选与高产栽培技术研究

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2、中医药大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。(保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名≥易％碚论文导师签名13期：婶年‘月唯日彳丽舴摘要栀子(GardeniajasminoidesEllis)又名山栀子、黄栀子、红栀子，为茜草科(Rubiaceae)多年生常绿灌木，分布于我国江西、四川、湖南等南方各省，喜温暖湿润、阳光充足的环境，较耐旱，忌积水。为2010版《中国药典》收录的中药材栀子原植物。目前有关栀子药材的化学、药理学等方面的研究已有较多报道，

3、但对栀子原植物的DNA指纹鉴定、以及关于优良栀子品种质的筛选研究却少有报道。本课题在前人研究工作基础上，采用RAPD即随机扩增多态DNA(randomamplifiedpolymorphismDNA，随机扩增多态DNARAPD)分子标记和并结合高效液相色谱法等技术(HighPerformanceLiquidChromatography，HPLC)，对在江西樟树吴城乡康成栀子基地发现的形态上有明显差别的14个栀子植株样品，从植株外部形态特征、叶片性状、果实性状及单株果实产量、果实有效成分含量等方面进行了比较分析和综合评价。同时

4、选取基地主要栽培的品种进行了基于提高栀子质量、产量和病虫害防治效果的高产技术等方面的评价研究。本研究的目的是：(1)通过形态指标客观鉴别基地栀子的不同种质；(2)通过RAPD比较分析14个样品的DNA指纹图谱，探讨它们间的遗传关系，从分子水平上进一步鉴定14个样品；(3)通过用HPLC色谱比较分析14个样品的栀子苷、西红花苷一1、绿原酸含量的差异，探讨栀子种质与质量的关系；(4)统计不同种质的单株产量，研究栀子种质与产量的关系；(5)建立栀子优良种质筛选的方法，并在基地筛选出优良栀子种质；(6)通过HPLC色谱比较分析几种不

5、同肥料和农药处理后栀子的栀子苷、西红花苷一1、绿原酸含量的差异，探讨不同肥料和农药处理与三种主要有效成分含量的关系，评价农药对虫害的综合防治效果，为栀子高产栽培技术规程制定提供依据；(7)综合两类研究，以期从而获得质量优良种质，及高产栽培技术。研究取得主要结果如下：1．基地栀子形态鉴定。调查了基地栀子的种质资源，采集了14个样品，对照《中国植物志》检索，均符合黄栀子的外形特征。经SPSS19软件分析各个样品的形态指标，14个样品可以分为四大类：第一大类为14号，其特点是叶长、叶宽在所有样品中最小，果长、果宽，宿萼长也偏小，单

6、株果数较多，产量较高；第二大类为l号、4号、5号、7号、12号，其特点是叶长、叶宽、果宽均较大，其中1号产量最高，其余产量较低；第三类为2号、6号、8号、9号、10号、1l号和13号，其特点是叶长、叶宽均较小，其中8号产量较好，百果重最重，9号百果重最小，10号、11号和13号单株果数较多。第四大类为3号，其特点是除托叶较小外，其余叶长、叶宽、叶长宽比、果长、果宽、宿萼长、果长宿萼长比等指标均处于最高水平，但单株百果重较低。2．基地栀子分子鉴定。从12个RAPD引物中筛选出3个引物，共扩增出150条DNA条带，其中146条为

7、多态性条带，多态性条带比率为93．33％。获得了能有效区别14个栀子的多态性RAPD指纹图谱。聚类结果显示14个样品栀子形成2支，其中2号、6号首先聚类成一支，其它样品栀子形成另一大支。12个样品形成的大支中的栀子再聚类成4个亚支，其中1号、3号聚类成第1个亚支，10号、11号、13号、12号聚类成第2个亚支，4号、7号、14号、5号聚类成第3个亚支，8号、9号聚类成第4个亚支。第1亚支和第2亚支优先聚类，第3亚支和第4亚支形成另一分枝。分子鉴定进一步确认14个样品间存在差异；通过和形态聚类的对比，可见分子鉴定结果与形态鉴定

8、结果相似。3．筛选了优质品系。七大类栀子的有效成分含量和产量测定结果表明：有效成分最高的为类群四，但其产量最低；产量最高的是类群一，但其有效成分较低；类群六的三种有效成分均较高，产量也较大，是优良的栀子品系。建议基地以后在优良品系选种的时候可以优先考虑类群六的植株(即8号和9号栀子)作为种