侧钩木霉y01的分离、鉴定与固态发酵产孢研究

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1、侧钩木霉Y01的分离、鉴定与固态发酵产孢研究⑧论文作者签名:i刍壁丕3指导教师签名论文评阅人1:评阅人2:评阅人3:评阅人4:评阅人5:跫盆避豳簋名迸因篮盆近匾答辩委员会主席:堑鍪题盈盘委员1:厦通监丝委员2:型丝毖熬丝委员3:抽垄篮勉擅委员4:趣显釜碰委员5:答辩日期:TheSeparation,IdentificationandSporeProductionbySoHdStateFermentationofTrichodermaghanenseYO1Author'ssignature:一‘■‘·supervisor7Ssignature:Thesisre访ewer4.T

2、hesisre访ewer5:Chair:(Corrmtteeoforaldefence)Committeeman1:Committeeman2:Committeeman3:Committeeman4.Committeeman5:螋浙江大学研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得逝婆太堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名:为

3、孥翻签字日期:≥汐修年乡月,。日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解逝鎏太堂有权保留并向国家有关部门或机构送交本论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权逝鎏太堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)⋯黼张高穆确一佛噶签字日期:到/忙乡月/9日签字目期:刀/4年弓月浙江大学硕士论文致谢时光荏苒,转眼间硕士研究生的学习和生活即将结束。在这短暂的两年半的时光里,我收获了许多,也成长了许多。在这里,我要感谢一路陪我走过的老师,同学,家人和朋友们,谢谢你

4、们的包容、关心、鼓励与支持!首先感谢实验室三位老师,杨立荣、吴坚平和徐刚老师,是你们在我迷茫时,给我指明方向;在我困惑时,给我提供宝贵的建议;在我失意时,给我以信心和鼓励;无论在实验还是生活上,都给予了我悉心的教导和无徽不至的关怀,在此向您们致以我最真挚的感谢!愿恩师们身体健康,工作顺利!感谢实验室的郭法谋、裴晓林、陈辉、孟枭、马宏敏、费辉、李牧、张红玉等在实验上对我的指导和帮助,感谢戴晓庭、王璐、崔丽娟和张滢潭同学对我的支持和关心,感谢郭丽、周勇、何秀娟、蒙丽钧、徐佳、许方馨、李一冰、蓝舒琴、王金玉等师弟师妹对我实验上的帮助。正是你们的陪伴,让我的实验生活过得丰富多彩。愿

5、你们实验和工作顺利,早日梦想成真!还要特别感谢陈少云师兄,在您辛勤地指导和帮助下,我的实验和论文才得以顺利完成。感谢您在我迷茫和困惑时给予莫大的支持和鼓励。深深地祝愿您生活幸福,永远快乐!感谢我的室友鲁丹萍、陈姝含、魏笑莲对我一路的陪伴和关心,让我时时刻刻都感受到了家一般的温暖。愿你们的生活美满,事事顺利!深深地感谢父母的养育之恩,我的成长倾注了你们无数的心血。是你们无私的付出、鼓励和支持,让我顺利地完成了学业!衷心感谢两年多来所有关心我的人,在此向你们致敬!高雪丽二零一四年三月于求是园浙江大学硕士学位论文摘要摘要木霉菌(Trichodermaspp.)是极具生防潜力的真菌

6、之一,能通过竞争、重寄生、产生抗生素、诱导抗性、溶菌、植物促生等多种机制实现对植物病原真菌的拮抗作用,因而被广泛应用于农业生产。侧钩木霉(Trichodermaghanense)是拮抗木霉的一种,可以有效控制由腐病菌(Pythiumarrhenomanes)引起的水稻枯萎病。然而,目前有关侧钩木霉固态发酵方面的研究鲜见报道。本研究旨在通过对侧钩木霉培养基组分和培养工艺条件的优化,提高侧钩木霉的产孢量,以适应工业化生产侧钩木霉孢子制剂的需求。首先,通过稀释涂平板的方法从堆肥中分离得到三种形态不同的木霉菌,经过分子生物学的方法鉴定均为侧钩木霉(Trichodermaghanen

7、se),进而对其形态特征进行了研究。考察了三株侧钩木霉对3种常见的植物病原真菌的拮抗作用,其中侧钩木霉Y01和侧钩木霉Y02对病原菌拮抗作用明显。侧钩木霉Y01生长迅速,产孢丰富,确定其为本研究的出发菌。然后,在三角瓶中通过单因素筛选、Phckett-Burman实验、最陡爬坡实验和响应面分析确定适合侧钩木霉产孢的固态培养基最优配方:固态基质为麸皮、蔗糖0.56%、玉米浆0.56%、硫酸镁2.59%以及硫酸铵1.50%。确定最佳培养基初始含水量为35%,最佳初始pH值为9。在优化后的固态发酵培养基上,该菌孢子产量可

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