产表面活性剂菌株的筛选鉴定及对石油烃降解性能研究

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1、潼压料技大学论文题目：产表面活性剂菌株的筛选鉴定及对石油烃降解性能研究学科门类：理学一级学科：环境科学与工程培养单位：资源与环境学院硕士生：洛晶晶导师：花莉副教授2014年5月RESEARCHoNSCREENINGIDENTIFICATIoNOFBACTERIAPRoDUCINGSURFACTANTANDDEGRADATIoNPRoPEI汀YoNPETROLEUMHYDRoCARBoNSAThesisSubmittedtoShaanxiUniversityofScienceandTechnologyinPartialFulfillmentoftheRequirementsforth

2、eDegreeofMasterofScienceByJingjingLuoSul：ViceProfessorLiH1Supervisor：ViceProtessorLiHuaMay2014产表面活性剂菌株的筛选鉴定及对石油烃降解性能研究摘要随着全球经济快速发展，石油在很多领域被广泛使用，并成为重要的能源之一，然而石油烃的广泛使用会对自然环境及人类造成严重的危害，因此治理石油造成的环境污染势在必行。石油污染修复方法包括物理修复、化学修复和生物修复。其中微生物修复以其低毒、不会对环境造成二次污染等优点而备受关注。微生物是组成生态系统的重要成员，在污染物去除中发挥着重要作用，是生物修复中

3、的主力，然而在石油污染修复过程中，石油烃的疏水性会限制微生物对石油的降解。但一些微生物的细胞代谢物即生物表面活性剂，它是微生物在一定条件下代谢分泌产生的具有一定表面活性，集亲水基和疏水基结构于一分子的两亲性化合物，可以促进油的乳化，提高油的分散程度，增大菌株和油珠的接触机会，促进对石油烃的吸收和降解。本文从长期受油污的土壤中分离得到了7株产表面活性剂石油降解菌株，将其编号为菌1、菌2、菌3、菌4、菌5、菌6和菌7。经形态观察，Biolog鉴定和16SrDNA基因序列分析可知菌1和菌2都为革兰氏阴性菌粘质沙雷氏菌Serratiamarcescens，菌3为革兰氏阴性菌居植物柔武氏菌R

4、aoultellaplanticola，菌4，菌6和菌7都为革兰氏阴性菌克雷伯氏菌Klebsiellavariicola，菌5为革兰氏阳性菌蜡状芽孢杆菌Bacilluscereus。其中菌3、菌4和菌5能使发酵液的表面张力分别从36．10mN／m降低为20．20mN／m，20．74mN／m，21．78mN／m，表明这些菌产生的表面活性剂能具有较强的乳化原油的能力，展现了较大的应用潜力。论文还研究了筛选得到7株菌株的生长与表面活性剂物质分泌状况的关系。研究结果表明，随着时间增加，7株菌株的OD值随之增大，表面张力呈现下降趋势；对7株菌株产物进行提取和薄层层析，离子型分析和红外光谱分析

5、，初步判断其产物均为糖脂类物质，进一步分析发现其都为阴离子型；通过pH，初始油质量浓度，接种量和盐度四个单因素的变化研究菌1粘质沙雷氏菌，菌3居植物柔武士菌，菌5蜡状芽孢杆菌和菌6克雷伯氏菌对石油类物质降解能力，发现菌3居植物柔武氏菌和菌5蜡状芽孢杆菌降解性能较好；通过响应曲面法优化菌5蜡状芽孢杆菌的降解条件，得出其最佳降解条件pH为5．02，油质量浓度为3g／L，接种量为1199．98止，盐度为0．5g／L。在此条件下，菌株对石油的降解率为66．94％。此外，论文还对菌3居植物柔武士菌降解石油烃类物质机理做了初步探讨，通过测定居植物柔武士菌在降解石油类物质过程中表面张力和降解率的

6、关系，并选取正烷烃中正十六烷，环烷烃中环己烷，芳香烃中萘为代表物质观察居植物柔武士菌对其降解效果。结果表明在72h时菌株代谢稳定，大量产生表面活性剂物质促进石油类物质的降解；居植物柔武士菌对正烷烃和芳香烃有一定的降解能力，而对环烷烃降解能力较差。关键词：石油污染，生物表面活性剂，筛选，鉴定，产物，降解RESEARCHoNSCREENINGIDENTIFICATIoNoFBACTERIAPRoDUCINGSURFACTANTANDDEGRADATIoNPRoPEI汀YoNPETROLEUMHYDRoCARBONSABSTRACTAstherapiddevelopmentofgloba

7、leconomy,oiliswidelyusedinmanyareas，andhasbecomeoneoftheimportantenergy,however,thewideuseofpetroleumhydrocarbonshascausedseriousharmtonaturalenvironmentandhuman，SOthegovernanceofoilpollutionisimperative．Oilpollutionremediationmethods，i