五种乳酸杆菌益生菌株对变形链球菌生长及生物膜形成影响的研究

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1、⑧万方数据论文作者签名：指导教师签名：＼矾弋、，论文评阅人1：匿功登』塾援』逝江太堂匡堂院瞪届筮三医院评阅人2：釜壶适』数援』逝江省虫医药太堂旦膣医堂瞳评阅人3：亟查生』塾援』逝江太堂匡堂医隘属筮二医院答辩委员会主席：委员1：委员2：委员3：委员4：答辩日期：2014．05．14照垃一膣童一一口一儿一瞳羞～世世型堕医皇裂一医医毫堂堂堂鬟一江一婆迢业衄趔巫巫巫i¨y—i¨y—j¨y一班逝班鱼鱼鱼圭圭主一，／一．，一／一篓一慧一堂堕塑鹾地万方数据浙江大学研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得

2、的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得逝江太堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作⋯：歙膨一期：川年角1日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解逝江太堂有权保留并向国家有关部门或机构送交本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权逝江太堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学

3、位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：茅霖小巧莎导师签名：签字日期：妒钾穸年厂月1日惚响签字日期例睁朋7日万方数据浙江大学硕二1．学位论文致谢光阴荏苒，硕士研究生的学习即将结束。此论文的完成预示着我在浙江大学硕士研究生的结束，同时也是另一个阶段新的起点。所以在这里，我要对帮助我完成论文的所有人表示感谢。首先，我要对我的导师——陈晖教授，表示我最由衷的感谢，感谢陈老师在我攻读硕士学位中对我所付出的一切心血，研究生期间，在课题设计、实验开展、实验室工作、论文撰写等各个方面，导师给予了悉心指导和无私帮助。在此，对导师三年来对我学术上

4、的精心指导与生活上的关怀表示最崇高的敬意和最衷心的感谢。同时，我要感谢所有教导过我、关心过我的浙江大学医学院附属口腔医院各位领导、老师和同学们。感谢浙江大学附属儿童医院细菌室的李建平老师及曹禾谦老师对本实验细菌培养的指导和大力支持。衷心感谢浙江大学分子生物学实验室硕士研究生孙婷对本实验电泳的大力支持及帮助。衷心感谢父母的养育之恩，他们是我求学路上的坚强后盾，他们对我无私的爱与照顾是我不断前进的动力。最后，祝福所有即将毕业的同学们，祝愿大家以后的生活更美好!林小龙2014年4月24日万方数据浙江大学硕士学位论文中文摘要五种乳酸杆菌益生菌

5、株对变形链球菌生长及生物膜形成影响的研究【目的】浙江大学医学院口腔临床医学硕士研究生林小龙导师陈晖中文摘要变形链球菌(Streptococcusmu纪ns，MS)是一种在口腔中与龋病相关的最常见的细菌，乳酸杆菌(1actobacillibacteria，LB)和双歧杆菌是最常见的益生菌，同时也被认为是龋病的致病菌之一。目前关于它们对变形链球菌作用的研究较少，其抑制变形链球菌的机制还未明确。本研究的目的在于通过菌落计数观察不同种类LB及其上清液对MS生长的作用，并通过荧光显微镜观察LB上清液对MS生物膜的抑制作用，同时研究益生菌对高龋儿

6、童口内MS临床分离株的生长的影响，初步研究LB抑制MS的作用及其作用机制，探讨其预防龋病的临床应用价值。【材料和方法11．LB及其上清液对MS的抑菌作用：实验组选取五种LB菌株∞．caseiShirota，L．caseiLC01，三．plantarumST-III，L．paracaseiLpc一37，L．rhamnosusHN00111x106CFU／ml，1x108CFU／ml，3×108CFU／ml-S．个浓度各0．25ml，加浓度为1．5×108CFU／mlMS菌液0．25ml和1．5mlBHI液体培养基，对照组LB菌液以金黄色

7、葡萄球菌ATCC25923菌液代替。LB上清液对MS的抑制实验中，未经过和经过pH调节和超滤处理的五种LB上清液代替上述步骤中的LB菌液，对照组LB上清液以№s肉汤代替，分别370C6％C02培养箱培养24／]'时，梯度稀释，计数MS菌落。II万方数据浙江大学硕士学位论文中文摘要2．LB对MS生长及生物膜形成的抑制作用：实验组取1．5x108CFU／ml浓度的MS悬液0．1ml，加入内置盖玻片的无菌培养皿中，分别加入9．5mlBHI液体培养基，0．4ml上述五种LB上清溶液，对照组LB上清液no．4ml生理盐水代替，6％C02培养箱培

8、养24小时获取和固定生物膜，用0．01％的吖啶橙AO进行染色，荧光显微镜下观察。3．SDS-PAGELB上清液经过超滤后冷冻干燥，溶于100ulN纯水，置于15％的Tris—HCL预制胶电泳90分钟，考马斯亮蓝R250染