鸡爪花品系金银花的issr遗传多样性和hplc指纹图谱的研究

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1、提要目的：研究金银花主要栽培品系鸡爪花系的ISSR-DNA标记与HPLC指纹图谱、有效成分含量测定，初步探索鸡爪花系各品种的遗传多样性及其与HPLC指纹图谱、有效成分含量的对应关系，为金银花品种的划分、优良种质的选育和规范化种植提供理论依据。方法:采用ISSR分子标记对12个鸡爪花品系金银花进行分析,利用NTsys2.10e软件处理数据，用非加权平均法(UPGMA)对扩增结果进行聚类分析，计算各农家品种的遗传相似系数；采用HPLC法建立鸡爪品系金银花的高效液相指纹图谱，并分别测定12个鸡爪花品系金银花的绿原酸、咖啡酸、木

2、犀草苷和异绿原酸A四种化学成分的含量。结果：从50条ISSR引物中筛选得到15条引物对12个鸡爪花品系金银花进行了PCR扩增，共扩增出309条带，多态性条带240条，多态性比率为77.67%，表明鸡爪花品系金银花的遗传多样性丰富。各农家品种间遗传相似系数的变化范围在0.6408?0.8738之间。12个鸡爪花品系金银花品种可按地域性分为山东与河南新密两大类，同一道地产区栽培品种的亲缘关系较近。采用HPLC法构建了12个鸡爪花品系金银花的化学指纹图谱，确定了13个共有峰，根据峰面积进行聚类发现12个鸡爪花品系金银花也可分为

3、山东与河南新密两大类；并测得不同农家品种的绿原酸、咖啡酸、木犀草苷和异绿原酸A的含量均有不同。结论：通过研究鸡爪花品系金银花的ISSR遗传多样性与HPLC指纹图谱、有效成分含量，发现各农家品种间具有明显的地域性特征。从ISSR聚类结果和HPLC指纹图谱的聚类结果中均体现这一特点，这表明地理因素对鸡爪花品系金银花的影响较为显著。关键词金银花；鸡爪花品系；简单序列重复间区；遗传多样性；高效液相指纹图谱；含量测定StudyofthegeneticdiversitybyISSRMakerandtheHPLCfingerprint

4、ofJizhaostrainofLonicerajaponicaThunb.Speciality:TraditionalChinesePharmacologyAuthor:KangYuqiuTutor:ProfessorGuoQingmeiAbstractObjective:TostudythegeneticdiversitywithISSR-DNAandtheHPLCfingerprint,effectivecomponentsofJizhaostrainofLonicerajaponicaThunb.andexplo

5、retheircorreclation.ThedatacouldprovideconferenceevidencefordividingthecultivarsresourceandstandardizedplantingofLonicerajaponicaThunb.Methods:The12JizhaostrainofLonicerajaponicaThunb.cultivarswereanalyzedbymeansofinter-simplesequencerepeat(ISSR)markers.NTsys2,1O

6、esoftwarewasusedtoprocessthedata.Thegeneticsimilaritycoefficientswerecalculatedbythesoftware.Andtheclusteranalysisindicatedtheabundantgeneticdiversityin12JizhaostrainofLonicerajaponicaThunb.wasconstructedbyusingUPGMAmethod.TheHPLCmethodwasusedtoestablishHPLCfinge

7、rprintandtodeterminethecontentsofchlorogenicacid,caffeicacid,luteolinandischlorogenicacidAofJizhaostrainofLonicerajaponicaThunb.Results:15highlystableandrepeatableISSRprimers(selectedfrom50primerstested)detectedatotalof309bands,inwhichtherewere240polymorphicbands

8、,andthepercentageofpolymorphicbandswas77.67%.TheresultindicatedthattheJizhaostrainofLonicerajaponicaThunb.hadabundantgeneticdiversity.Thegeneticsimilaritycoeff