支持细胞紧密连接复合体在氧化应激损伤小鼠睾丸精子发生中的作用

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1、AthesissubmittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterRoleofSertolicelltightjunctionsinthepathogenesisofmalereproductivedysfunctioninducedbyoxidativestressinmlCeByJunchangQinSupervisor：Prof．WeixingZhangSurgeryFirstClinicalCollegeApirl2012√学位论文原创性声明lIIEIIIIIIIIIIIIIIIIlY210221

2、1本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。靴敝储：胁日期：例p年，月岁／日学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅：本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据

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4、inl1表达量变化及其在生精功能恢复过程中与精子发生的关联性，以探讨氧化应激损伤睾丸精子发生中支持细胞紧密连接复合体功能变化；明确支持细胞紧密连接复合体于受损的睾丸生精功能恢复过程中所起的作用。．方法：(1)48只雄性昆明小鼠随机分配至A、B、C、D4组，每组12只，A组空白对照，B、C及D三组分别以2Gy、6Gy及10Gy剂量60Co吖射线局部照射实验动物下腹部一次，于6周后处死，测定实验小鼠身体及双睾丸重量；HE染色观察睾丸组织学变化；酶联免疫法检测血清FSH水平；RefltimePCR监测睾丸组织内Claudinl1转录水平变化。(2)42只昆明

5、雄性小鼠，随机分配为：空白对照A组，受2Gy、6Gy、10Gy60Ccry射线单剂量射线下腹局部照射的B、C、D组，及受6Gy剂量照射后应用l、2及499d剂量E2干预4周的E、F、G组。于照射后6周，收集睾丸，称重，行HE染色，计算各组睾丸曲细精管分化指数(TOI)，应用RT-qPCR检测各组hlllibinBB、Claudin3、Claudinl1mRNA变化，WesternBlot检测各组Claudml1摘要蛋白表达。结果：(1)不同剂量射线致睾丸氧化应激损伤后睾丸重量下降(P<0．05)，以C、D组更为明显(氏O．01)；与A组相比，受射线照射

6、三组TDI下降明显(P<0．05)，曲细精管直径减小，生精上皮排列紊乱；血清FSH上升，D组较A组升高1．9倍；伴随睾丸生精功能下降，组织内Claudinll转录水平呈现增高趋势，C、D组两组Claudinl1mRNA水平高于正常对照之A组(尸

7、audinll蛋白增加(allPO．013；t=-．2．256，P>O．013)。Claudin．3、Clauindin．11表达与睾丸生精功能呈现负相关关系rs---0．884，P<0．05；轳-0．758，P<0．05)。结论：射线致睾丸氧化应激压力下伴随着睾丸

8、生精功能的损伤，血清FSH含量升高，支持细胞合成及分泌功能受损；睾丸组织内Claudin-11