昆虫乙酰胆碱受体β亚基毒理学特性研究与新外源表达平台的建立

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1、分类号学号南京蔑鼍戈学$433．3’2009202030博士学位论文昆虫乙酰胆碱受体13亚基毒理学特性研究与新外源表达平台的建立姚香梅IIIIIIIIIIIImlllllllllllUlllllllllllhlllY2360689TH[EPHARMCOLOGICALCHARACTERISTICSOFINSECTNICOTINICACETYLCHOLINERECEPTORpSUBUNITSANDSET．UPOFANEWEXPRESSIONSYSTEMByXiangmeiYaoADISSERl、ATIO

2、NSubmittedtoNANJINGAGR【CUIJURALUNIVERSITYINPARTIALFUFILLⅧNT0FTHEREQUIREMENTSforDOCTORDEGREESupervisedby一“广7T’FrotessOr乙eWenL1UCollegeofEntomologyCollegeofPlantProtectionNanjingAgriculturalUniversity，Naniing210095，P．R．ChinaCompletedJune．2012原创性声明本人郑重声明：

3、所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者(需亲笔)签名：姚番梅Zolz：年。倜吖日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南京农业大学可以将本

4、学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编学位论文。保密口，在——年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密口。(请在以上方框内打“√”)学位论文作者(需亲笔)签名：出邑香7b导师(需亲笔)签名：卅己杉勾：挥口汨D．『日2c,／z年。倜D佃目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．第一章文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．I1乙酰胆碱受体概述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯12烟碱型乙酰胆碱受体的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22．1烟碱型乙酰胆碱受体的功能区域⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．52．2脊椎动物的烟碱型乙酰胆碱受体的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．82．3无脊椎动物的烟碱型乙酰胆碱受体研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯102．4线虫烟碱型乙酰胆碱受体的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯103昆虫烟碱型乙酰胆碱受体的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

6、⋯⋯⋯⋯⋯．．113．1美洲大蠊烟碱型乙酰胆碱受体的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯123．2昆虫烟碱型乙酰胆碱受体亚基组成的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯144昆虫烟碱型乙酰胆碱受体13亚基的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．154．1昆虫乙酰胆碱受体亚基重要的区域对新烟碱类杀虫剂的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯164．2昆虫乙酰胆碱受体氨基酸变化对新烟碱类杀虫剂的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯165乙酰胆碱受体外源表达系统的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

7、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．195．1早期乙酰胆碱受体外源表达研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯195．2乙酰胆碱受体的基因分子克隆⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯205．3体外细菌、酵母细胞中表达重组乙酰胆碱受体⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯205．4模式生物中表达重组乙酰胆碱受体⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2l5．5细胞系中表达重组乙酰胆碱受体⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯215．6非洲爪蟾卵母细胞中表达重组乙酰胆碱受体⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

8、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯226新外源表达系统的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯～277研究目的与意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．28第二章昆虫乙酰胆碱受体P亚基D、E、F环上氨基酸对新烟碱类杀虫剂选择性影响⋯⋯⋯311材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．331．1材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．33