中华蜜蜂头部cdna芯片研制及基于芯片的抗螨性研究

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1、浙江大学硕士学位论文中华蜜蜂头部cDNA芯片研制及基于芯片的抗螨性检测研究浙江大学研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得逝婆盘堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：]嘲字日期：7一号年∥月r日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解溢鎏盘堂有权保留并向国家有关部门或机构送交

2、本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权逝鎏盘堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位敝储签名：袖命一咚，签字日期：纠K年伽歹日III导师躲陋乞孚签字眺硼年多月厂日浙江大学硕士学位论文中华蜜蜂头部cDNA芯片研制及基于芯片的抗螨性检测研究第一章文献综述1．1中蜂抗螨行为学研究进展1．1．1前言养蜂业在我国具有很重要的经济地位，作为我国传统养殖业，已有3000年以上的悠久历史，在中华民族发展史上具有非常重

3、要的地位和作用。我国是世界养蜂大国，目前全国养蜂量在700多万群以上，占全球蜂群总数的1／7左右，养蜂人数高达20余万人。2006年蜂蜜产量达33．3万吨，蜂王浆约3000吨，蜂产品产量和出口量均居世界第一(中国统计年鉴，2007)。但与此同时，一些长期困扰我国养蜂业健康发展的问题，在日趋激烈的国际贸易竞争中也日益突出，特别是生产过程中防治蜂病所造成的农药残留问题，直接影响蜂产品质量，经常遭遇国际贸易绿色壁垒。大蜂螨是对世界养蜂业威胁最大的蜜蜂病虫害。长期以来，由于意蜂治螨过度依赖化学杀虫剂，导致螨虫抗药性提高，蜂产品中农药残留问

4、题日趋严重，促使蜂种抗螨性，特别是中华蜜蜂(中蜂，和括ceranacerana)等东方蜜蜂(彳．cerana)的抗螨行为和机制受到重视(李旭涛，2001)。利用中蜂抗螨行为相关基因，通过遗传工程培育和改良意蜂品种受到国际上的高度关注(黄文诚，1995)。利用基因芯片，在分子水平上研究中蜂的抗螨机理，对加快养蜂业品种的选育，寻找新基因、疾病诊断、药物筛选等均具有重要的价值。1．1．2中蜂抗螨行为学概述大蜂螨(狄斯瓦螨，VarroadestructorAnderson&Trueman)是对世界养蜂业威胁最大的蜜蜂病虫害，现在，世界上除

5、了澳洲之外，各地西方蜜蜂(A．mellifera)几乎都有蜂螨寄生，不只如此，澳洲新西兰的蜜蜂近年来也遭到蜂螨的侵害(宋延明，2007)。大蜂螨于1953年在前苏联发现危害，我国予1955年在浙江发生，随后大蜂螨在亚洲及东欧传播，上世纪70年代先后传入中、西欧，80年代后期先后传播到美国、加拿大等国家(周婷等，2007)。大蜂螨是严重危害引进西方蜜蜂，包括意大利蜜蜂(意蜂，A．melliferalingustica)的蜂5浙江大学硕士学位论文中华蜜蜂头部cDNA芯片研制及基于芯片的抗螨性检测研究螨。大蜂螨若寄生在封盖内，则使蜂蛹发

6、育不良，对西方蜜蜂蜂群的危害是毁灭性的、一般蜂群一每年要用药物防治4-6次，否则会遭到毁灭性损失(王强等，2004)。但大蜂螨对亚洲土著蜜蜂东方蜜蜂包括其亚种，原产于我国的中蜂则没有明显的危害。虽然我国在1956年就发现中蜂有大蜂螨寄生，但长期以来大蜂螨对中蜂一直未造成明显危害，其原因是中蜂为土著大蜂螨的原始寄主，在长期的协同进化的过程中，大蜂螨已经与寄主形成近似共生的相互适应关系，中蜂已经形成了很强的防卫机制和行为(张春善译，1990)：首先是中蜂工蜂幼虫封盖期较短，不能满足大蜂螨的发育要求，且大蜂螨主要在封盖期的雄蜂幼虫上繁育

7、：更重要的是工蜂对大蜂螨和被感染的蜜蜂幼虫有很强的行为反应和清除行为，包括自身清理、蜂伴间相互清理、群体清理和清理舞(黄文诚，1995)。而意蜂是19-20世纪引进的外来蜂种，对蜂螨缺少防卫能力，自意蜂在亚洲接触到大蜂螨以来，大蜂螨就成为意蜂的寄生虫，并蔓延到世界各地。意蜂一旦发生大蜂螨，雄蜂和工蜂都会100％感染，蜂螨数量增长很快。相关研究发现，中蜂工蜂复眼能发现大蜂螨，触角能接受大蜂螨的气味物质，从而一起咬蜂螨行为(杨冠煌和林桂莲，2002)。当工蜂被蜂螨附着后，会立即引起尾部摆动，发出高频率声波，招呼其他工蜂前来梳理，寻找蜂

8、螨，并将蜂螨叼走。当在中蜂蜂群中人为引入受蜂螨感染的西方蜜蜂子脾后，中蜂工蜂便表现出很强的行为反应，会咬开有蜂螨的房盖，拖出被蜂螨感染的幼虫。而当西方蜜蜂蜂群中人为的引入受大蜂螨感染的中蜂子脾后，72小时以后，从封盖房里的幼虫和刚出房的幼蜂提上均发