猪传染性胸膜肺炎诊断技术和疫苗的研究

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1、78以科学发展现促进科拄创新《上)7NewmanRH，HemmingSonjA，Determinationo{thedegreeofcrystallinityofcelluloseinwoodbycar“bon一13NMRspectroseopy．Hohforsehung．1990，44：351～3558SatoS．Shirai5hiNandSadohTeta1．Settingofwoodusingseveralcellulose—andlignin—so[vents·Materialr1975，24(264)：885～8899S

2、hiraishiN．Sat。SandYokotaT．Theinteractionofwoodwithorganicsolvents．Ⅵ．thedecrystalliza—tionofw0。dbytheuseofS02一DEA—DMSOsolutionandthegraftpolymer[。ationwithincellwallofwood．MokuzoiGakkaishi．1975，21(5)：297～30410Te舀；rR，SerimaaR．PaakkariT．Crysta[1inltyofcellulosedetermined

3、byCP／MASNMRandXRDmethods．PolymButl．1987，17：231～23711ToboskyAV，PrettymanIB，DillonJH．StressrelaxationOfnaturalandsyntheticrubberstocks．JApplPhys．1944，15：380～395作者简介谢满华，北京林业大学材料科学与技术学院在读博士研究生。联系电话：010—62329685：E—maii：xiemanhua77@sohu．tom。猪传染性胸膜肺炎诊断技术和疫苗的研究周锐陈焕春武汉市洪山区狮子山街

4、1号，华中农业大学动物医学院，430070摘要猪传染性胸膜肺兜是由胸膜肺炎放线杆茵引起的一种猪呼吸道传染病，每年给养猪业造成严重的经济损失，诊断技术和疲苗的研究是防治谊痛的关键。本文总结了本实验宣在这两方面的研究进展。根据胸膜肺炎放线杆茵的血清型、生物学特征和分子生物学研究进展．我们研制了基于其外毒素ApxIV和ApxlI的诊断方法，以及三价灭活疫苗和基因工程类毒素茵苗。其中基于ApxIV的PCR和问接ELISA诊断技术可以用于该病的珍断和区分疫苗免疫与野毒感染的鉴别诊断；基于ApxII的间接ELISA技术可以用于疫苗免疫后抗体的

5、检测和免疫效果的评估。三价灭活疫苗可以保护仔猪抵抗我国流行的大多数胸膜肺炎放线抒菌茵株的攻击．基因工程类毒素茵苗是在三价灭活疫苗基础上的改进，降低了疫苗免疫的副反应．大大提高了免疫保护率和拓宽了免疫保护谱。此外，我们还构建了胸膜肺炎放线杆茵毒力缺失突变株，为研审1羁毒活疲苗奠定了基础。关键词猪传染性胸膜肺炎诊断疫苗外毒素近年来，猪呼吸系统传染病成为养猪业的头号杀手，其中由胸膜肺炎放线杆菌(Aetinobacilluspleu—ropneumoniae，APP)引起的猪传染性胸膜肺炎的危害尤为严重。APP是“嗜血杆菌一放线杆菌一巴氏

6、杆菌”类群中的一种革兰阴性小杆菌，目前鉴定的有15种血请型，在环境和免疫系统的压力下，新的血清型还在不断出现，目前已经有很多尚不能确定的血清型。已知的毒力因子有外毒素、荚膜多糖、脂多糖、转铁结合蛋白和脲酶等，其中外毒紊是最主要毒力因子，目前已经鉴定的外毒索有Apxl、ApxlI、ApxllI和ApxlV四种，其中前三种具有溶血和f或细胞毒性，目前尚未发现ApxlV具有明显的毒力。每种血清型的菌株只分泌四种毒素中的2～3种。以科学发展观促进科技创新(一)79猪传染性胸膜肺炎在我国是一种新发传染病，其病原血清型众多，不同地区和猪场流行

7、的血清型不尽相同，我国流行的优势血清型主要是1、2、3和7型。各血清型之间很少有交叉免疫保护作用，抗生素治疗不仅成本很高，控制后极易复发，而且细菌不断产生耐药性，大量使用抗生素还会导致药物残留，影响食品安全。因此研制安全高效的疫苗和诊断技术对预防和控制该病具有十分重要的意义。本文将总结我们实验室在该病诊断技术和疫苗研究方面的进展。一、诊断技术研究(一)基于ApxIV的诊断方法所有15种血清型的APP菌株均能在感染动物体内分泌ApxlV，但在体外培养条件下不分泌，而且ApxlV是其他种的放线杆菌(如A．rossii，A．suis)所

8、不具有的Apx毒素，因此，基于ApxIV的诊断方法既可以用于猪传染性胸膜肺炎的特异性诊断，又可以用于区分灭活疫苗或亚单位疫苗免疫猪与野毒感染猪的鉴别诊断。为此，我们设计了两种基于ApxlV的诊断方法，一种是检测抗原的apxIV—PCR，另一种是检测