microrna-217对人皮肤成纤维细胞衰老的作用及机制研究

《microrna-217对人皮肤成纤维细胞衰老的作用及机制研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、万方数据中图分类号UDCR751610博士学位论文microRNA一217对人皮肤成纤维细胞衰老的作用及机制研究StudyontheroleandmechanismofmicroRNA一217incellularsenescenceofhumanskinfibroblasts作者姓名：学科专业：研究方向：学院(系、所)：指导教师：副指导教师：汪彝临床医学皮肤病与性病学中南大学湘雅医学院谢红付教授李吉副教授论文答辩日期诬f吆』：乡答辩委员会主席中南大学二零一四年五月万方数据学位论文原创性声明本人郑重声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取

2、得的研究成果。尽我所知，除了论文中特另tlDi：l以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均己在论文中作了明确的说明。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。作者签名：渤日期：巫年』月丛日学位论文版权使用授权书本学位论文作者和指导教师完全了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定：即学校有权保留并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版；本人允许本学位论文被查阅和借阅；学校可以将本学位论文的全部或部分内容编入

3、有关数据库进行检索，可以采用复印、缩印或其它手段保存和汇编本学位论文。保密论文待解密后适应本声明。作者签名：主生趣日期：立坐年生月监日导师签名万方数据本课题资助基金国家自然科学基金面上项目(81271775)国家自然科学基金面上项目(81171520)II万方数据八年制博士学位论文中文摘要microRNA．217对人皮肤成纤维细胞衰老的作用及机制研究摘要生物体衰老是一个包含不同器官和系统的、发生一系列特定变化的复杂过程。皮肤衰老是机体衰老最直接的表现，本质和基础是皮肤细胞的衰老，其不仅受控于遗传基因的调节，也受控于表观遗传的调控，后者是衰老发生的重要机制

4、，包括DNA甲基化、组蛋白修饰、染色质重塑及microRNA(miRNA)调控等。miRNA．217是一种已知高表达于人脐静脉内皮细胞及人冠状动脉内皮细胞中的miRNA，已被证实其在胰腺导管腺癌中能通过靶向调控KRAS起到肿瘤抑制因子的作用，还可靶向调节Runx2，从而影响成骨细胞成熟。在衰老机制的研究中，已有报道显示，miR-217在衰老的血管内皮细胞中表达上调，并可通过抑制长寿基因Sirtl的表达导致血管内皮细胞的衰老。然而，至目前为止，miR．217对于皮肤衰老的作用研究还不清楚。本课题组前期通过miRNA芯片发现传代衰老组与年青组人皮肤成纤维细胞

5、(Humanskinfibroblasts，HSF)比较，miR．217的表达量明显增加。因此，我们推测miR-217可能在HSF衰老中起到了重要作用。本研究通过三个部分证实miR-217在HSF衰老中的作用机制。第一部分：检测比较年青组与衰老组HSF中miR-217的表达。第二部分：研究miR-217在HSF衰老过程中的作用。通过在年青组HSF中过表达miR．217并检测细胞衰老的表型及相关衰老蛋白的表达，以探讨miR．217在细胞衰老中的作用。第三部分：研究miR-217调控HSF衰老的机制：(1)通过生物信息学预测，发现miR．217可能直接靶向D

6、NA甲基化转移酶1(DⅫⅥT1)，利用双荧光素酶报告基因系统证明两者的直接靶向关系；(2)在HSF中，检测miR．217对DNMTl表达量的调节，及其通过DNMTl对细胞衰老调节的机制。通过以上研究揭示miR-217能够通过下调DNMTl来促进HSF的衰老，为皮肤衰老的研究和治疗领域提供新的方向。第一部分年青组与衰老组人皮肤成纤维细胞中miR-217的表达目的：检测自然衰老与传代衰老HSF中miR-217的表达水平。III万方数据八年制博士学位论文中文摘要方法：收取少年组(<10岁)、中年组(30～50岁)与老年组(>60岁)的正常人避光部位皮肤，原代培

7、养HSF，并将少年组HSF进行传代(年青组：P3．5，衰老组：P20．25)，采用Real．timePCR方法检测miR-217的表达量。结果：和少年组细胞比较，中年组、老年组HSF中的miR0217表达量明显升高(中年组：P

8、对人皮肤成纤维细胞衰老的作用目的：研究miR．217在HSF衰老过程中的作用。方