mef2基因家族与myomirs在鲤鱼肌肉中的表达分析

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1、万方数据学校代码：10225学号：S1457l学位论文mef2基因家族与MyomiRs在鲤鱼肌肉中的表达分析指导教师姓名：申请学位级别：论文提交日期：授予学位单位：滕春波硕士周迪东北林业大学2014年4月东北林业大学学科专业：发育生物学论文答辩日期：授予学位日期：答辩委员会主席：论文评阅人：聋必栉素大擎万方数据RcgisterCode：S14571DissertationfortheDegreeofMasterEXpressionanalysesofMe亿familygenesandMyomiRsinC唧muscleCandidate：Supenrisor：As

2、sociateSuperVisor：A船demicDeg№eAppliedfor：SpeciaH蚵：ZhouDiPm￡TengChullboMasterDevelopmentalBi0109yDateofOralExamination：Universi够：NortheaStForest叮UniVersi哆万方数据摘要鲤(o矿切淞c唧如)是目前世界上养殖范围最广的淡水鱼类之一，鲤鱼养殖在世界各国的天然捕捞业和淡水养殖业中均占有相当大的比重，在中国的淡水渔业生产中也占据着重要地位，所以对鲤鱼的研究，特别是对其生产性状的研究并选育出有利于农业生产的品种具有重要意义。肌

3、细胞增强因子2(Inyoc)rtee11ll觚cer蠡lctor2’MEF2)是MADS-box转录因子家族的成员。MEF2蛋白具有结合DNA的活性，在调控成肌细胞分化相关基因的表达中发挥着重要作用，在心肌、骨骼肌与平滑肌发育过程中均能够介导细胞的分化。另外，MEF2还能够通过直接或者间接调控InicroRNAs来控制肌肉发育。MicroRNA(IIliRNA)是～类由内源性基因编码的长度约为18-25个核苷酸的单链小RNA分子，miRNA不能够被翻译成蛋白质，但能够参与转录后水平调节基因的表达。肌肉组织中表达较高的lIliRNAs通常被称为MyomiRs，目前

4、研究发现，miR-l，IIliR-24，IlliR-27b，IniR-133，IIliR．181a，IIliR-206，111iR一208，而艮22l／222，miR-486以及IIliR-499都属于MyomiRs的成员，在肌肉发育中起重要的调控作用。由于鲤鱼并不多用于试验研究，所以Genb锄k数据库内并无鲤鱼MEF2家族全部成员的序列信息，需要实验室利用数据库进行比对，结果发现鲤鱼的MEF2家族与小鼠等脊椎模式动物一样，共有4个成员：mef2a、rm亿b、mef2c以及mef2d，其中mef2c分为两种不同的基因，Ine亿ca和mef2cb。为了研究MEF2

5、家族在鲤鱼早期发育中的作用，本试验利用整体原位杂交技术检测了MEF2基因在鲤鱼不同发育时期(6h、12h、24h和48h)胚胎中的时空特异性表达，发现MEF2家族成员在早期鲤鱼胚胎中均存在表达，其中me亿ca和Inef2d仅在体节等早期肌肉组织中表达，me亿b仅在神经系统中表达，而mef2a和mef2cb在肌肉组织和神经组织中均有表达。在一年生鲤鱼各主要组织和器官中MEF2家族各成员的表达与鲤鱼胚胎时期整体原位杂交的结果基本相同，推测Im也a，me岔b和me亿cb对早期鲤鱼神经发育有作用；mef2a，mef2ca，rne岔cb和n圮岔d对早期鲤鱼肌肉发育有作用。

6、此外，本研究采用表型特征分析、实时定量荧光PCR检测和SPSs数据处理分析，研究了德国镜鲤、黑龙江野鲤和荷包红鲤肌肉中5个MyoIIIiR5(IIliR_l，lIliR．2l，IIliR．23a，miR一133和IIliR-206)的表达差异，及其与鲤鱼的生长性状的相关性。结果显示，不同品系鲤鱼体重、体高和体厚与Myomi风表达有相关性，其中鲤鱼的体高／体长与nliR-2l和lIliR_23a表达量呈显著负相关；体厚／体长与IIliR．1表达量呈显著正相关，而与nliR_2l和nliR．23a表达量呈显著负相关；肉重／体重与miR．206表达量呈显著正相关，表明

7、rIliR-206等MyomiR5可以作为检测分子用于分析鲤鱼的生产性状。本研究首次检测了对肌肉发育有影响的肌细胞增强因子2在鲤鱼胚胎中的表达，并且将MyomiRs的表达与鲤鱼的生产性状相联系，以上研究有助于我们在将来更好的万方数据摘要研究鲤鱼发育的分子机制，为经济鱼类的品种改良提供科学依据。关键词：鲤鱼；MEF2；整体原位杂交；MyomiRs；相关性分析万方数据Abs眦tAbstractCa叩(劬加搬c口伊fD)isoneof廿lernost、析delyculturedf-reshwatcrfishspecieSinme、Ⅳorld．ClⅢrently，ca印

8、breediIlgocc