lncrna spry4--it1在食管鳞癌中的表达及功能研究

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1、分类号：R735密级：一般题单位代码：学号：1031220111638南京医斜犬掌硕士学位论文目：LncRNASPRY4-IT1区边熊珏究研究生：指导教师：学科专业：学院名称：完成时间：谢海伟曹秀峰肿瘤学第三临床医学院2014年4月6日㈣剐南京医科大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下，独立进行研究T_fF所取得的成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人作者签名：咖每纬导

2、师答名：彰秀啤明巧，’，I学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南京医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于(请在以下相应方框内打“√”)：l、保密口，在一年解密后适用本授权书。2、不保密影作者签名：l釉吁日期：易仟年6月p日刷磁名％咩醐：加‘年以p日上缈。月厂b6年伶滞．少加吵‰期南京医科大学硕士学位论文目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．2前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5翮舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7一、主要材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．71、组织标本搜集⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．72．细胞系⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．83．实验动物⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯84．主要试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯85．主要仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8二、实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．91．RNA提取及实时荧光定量PCR(qRT—PCR)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．92．细胞传代、培养及转染⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．123．MTT法绘制细胞生长曲线⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯134．平板克隆形成实验⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯135．流式细胞仪检测细胞周期和凋亡⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯136．Transwell检测细胞迁移侵袭能力变化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯147．划痕实验检测细胞迁移能力变化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯148．裸鼠成瘤实验⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．159．统计分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．15结果

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．151．SPRY4一ITl在ESCC中的表达及与临床病理特征的关系⋯⋯⋯⋯．．152．SPRY4一ITl的相对表达水平与患者预后的关系⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯193．敲低目的基因的表达⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．21南京医科大学硕士学位论文4．敲低SPRY4-ITl的表达后对ESCC细胞活力的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯245．敲低SPRY4-ITl的表达后细胞克隆形成能力的改变⋯⋯⋯⋯⋯．．276．敲低SPRY4一ITl的表达对ESCC细胞凋亡的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．277．敲低SPRY4-ITl的表达对ESCC细胞周期的影响⋯⋯

6、⋯⋯⋯⋯．．308．敲低SPRY4一ITl的表达对ESCC细胞侵袭、迁移能力的影响⋯⋯⋯．329．体内抑制SPRY4-ITl的表达对ESCC细胞生长的影响⋯⋯⋯⋯⋯．37讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．39结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．42参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．43文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．48附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．64攻读学位期间发表文章情况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯66致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．672南京医科大学硕士学位

7、论文LncRNASPRY4一lT1在食管鳞癌中的表达及功能研究中文摘要背景与目的：食管鳞癌(ESCC)是临床最常见的恶性肿瘤之一，总体生存率很低，早期诊断、早期治疗是改善食管癌患者预后的关键，而寻找有效的分子标志物来指示食管癌的进程将有助于提高食管癌的诊疗水平。研究表明一些特殊的长链非编码RNA(1ncRNA)与肿瘤进展密切相关。已知SPRY4一ITl在黑色素瘤中起促癌作用，然而其在食管鳞癌中的作用尚未见报道。本研究的目的是探讨SPRY4-ITl在食管鳞癌中的表达并进一步研究其临床意义及生物学功能。方法：用qRT—PCR检测92例食管鳞癌组织及癌旁正常组

8、织中的SPRY4一ITl表达。预后资料用Kaplan—Meier及Cox回归分析