dp71在胃癌中的表达及其生物学意义研究

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1、万方数据中图分类号UDC6lO硕士学位论文学校代码密级10533Dp71在胃癌中的表达及其生物学意义研究AnalysisofDp71expressioningastriccanceranditsbiologicalsignificance作者姓名：曹晓霞学科专业：基础医学研究方向：病理学与病理生理学学院(系、所)：指导教师：基础医学院谭斯品副教授论文答辩日期‘伽比』、Ⅵ答辩委员会主席中南大学二0一四年五月万方数据学位论文原创性声明本人郑重声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方

2、外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。作者签名：聋!丝钰醐：址年』月号日学位论文版权使用授权书本学位论文作者和指导教师完全了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定：即学校有权保留并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版；本人允许本学位论文被查阅和借阅；学校可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用复印、缩印或其它手段保存和汇编本学

3、位论文。保密论文待解密后适应本声明。作者签名：翌!兰垦日期：逊L年』月耳日导师签日期：衄日7万方数据本课题受下列基金资助：1．国家自然科学基金：细胞膜相关蛋白新基因dystrotelin在氧化应激损伤心肌细胞模型中的变化及其机制研究(批准号：30800550)2．湖南省自然科学基金：Dysrotelin的心肌相互作用蛋A的筛选(批准号：10JJ4016)万方数据摘要：Dp71在胃癌中的表达及其生物学意义研究肌营养不良蛋白Dystrophin是导致杜氏肌营养不良症(Duchennemusculardystrophy，DMD)的致病基因，该基因在不同的组织

4、中和不同的组织特异性启动子结合，可以产生不同的剪切本。DystrophinDp71是其表达最广泛的一个剪切本。通过和其他一些蛋白形成蛋白复合物，Dp71在各个不同的组织起着支撑和信号传递的作用。相关文献报道Dp71介导的细胞的分化、增殖、黏附。改变Dp71的表达可以引起PCI2细胞的细胞周期发生改变。作为一种可以参与细胞分裂周期的蛋白，本课题检测Dp71mRNA和蛋白在胃癌组织和癌旁组织，正常人胃上皮细胞(GES．1)和胃癌细胞系(AGS，SGC．7901和BGC．823)中的表达，分析其表达差异是否具有统计学意义；消减Dp71蛋白在正常胃粘膜细胞GE

5、S．1中的表达，提高Dp71在胃癌细胞系SGC．7901中的表达，并检测细胞的活力与增殖能力，初步探讨Dp71在胃癌中表达改变的生物学意义。实验方法：(1)采用实时荧光定量PCR，westernblotting、免疫组织化学技术检测Dp71在胃癌组织及癌旁组织，人胃粘膜上皮细胞及--,de胃癌细胞系中的表达水平(2)PCR、酶切及连接反应构建Dp71的RNA干扰质粒，酶切、测序验证质粒构建是否成功，westernblotting检测构建的RNA干扰质粒对于人胃粘膜上皮细胞Dp71蛋白的消减效率(3)采用cck8法检测转染了Dp71的RNA干扰质粒人II

6、I万方数据胃粘膜上皮细胞，转染了Dp71真核表达质粒的SGC．7901细胞的活力与增殖能力。探讨Dp71的可能抑癌机制。实验结果：(1)Real．timePCR，westernblot和免疫组织化学和结果显示：Dp71在胃癌组织的表达明显低于癌旁组织。免疫组化结果表明：Dp71蛋白表达改变与胃癌的分化程度和淋巴结转移相关(P

7、干扰质粒，于人胃粘膜上皮细胞(GES．1)中转染Dp71干扰质粒，检测细胞增殖能力改变，发现干扰Dp71后，细胞增殖活力没有改变。(4)胃癌细胞SGC．7901转染Dp71真核表达质粒Dp71f，Dp71d，和转染空白质粒和空白SGC．7901细胞株相比，在48小时，72小时呈现出增殖能力下降。关键词：Dp71；胃癌；生物学意义分类号：R735万方数据AnalysisofDp71expressioningastriccanceranditsbiologicalsignificanceAbstractBackground：DystrophinDp71is

8、theoneofthemostwidelydistributedproductofdystro