生物产品降解酚类污染物功效评价技术规范征求意见稿.docx

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1、GB/TXXXXX—201X中华人民共和国国家标准ICS07.080A21生物产品降解酚类污染物功效评价技术规范Technicalspecificationofevaluationfordegradationofphenolpollutantsinbiologicproducts（征求意见稿）发布中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会201X-XX-XX发布201X-XX-XX实施1GB/T××××—201×前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由中国标准化研究院提出并归

2、口。本标准起草单位：。本标准主要起草人：。IGB/T××××—201×生物产品降解酚类污染物功效评价技术规范警告——本标准的使用可能涉及某些有危险的材料、操作和设备,但并未对与此有关的所有安全问题都提出建议。使用者在应用本标准之前有责任制定相应的安全和保护措施,并确定相关规章限制的适用性。1范围本标准规定了生物产品降解酚类污染物效果评价试验原理、仪器设备及器具、试剂与材料、试验步骤、结果分析。本标准适用于微生物和酶生物产品降解酚类污染物效果评价。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文

3、件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T2601酚类产品组成的气相色谱测定方法GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。3术语和定义3.1生物产品biologicalproducts利用生物技术获得的产品。3.2酚类化合物phenoliccompound芳香烃中苯环上的氢原子被羟基取代所生成的化合物，是芳烃的含羟基衍生物，根据其分子所含的羟基数目可分为一元酚和多元酚。警告：此类化合物可以吸入、食入或透过皮肤吸收而致中毒，低剂量摄入就严重中毒，也

4、是引致恶性肿瘤的物质。4原理一定条件下生物产品使表面活性剂发生降解后，剩余酚类物质经离心，过滤后，用气相色谱法测定，通过比较降解前后酚类化合物浓度变化，来判定该生物产品的功效。4GB/T××××—201×5仪器与设备5.1分析天平：精确到0.0001g。5.3pH计：精度±0.01pH。5.4高速冷冻离心机。6试剂与材料除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，实验用水均为GB/T6882规定的二级水。6.1酚类化合物纯度应大于等于95%。6.2100g/L酚类化合物储备溶液分别称取各种酚类化合物标准品1.000g，用

5、丙酮或无水乙醇溶解并定容至10mL容量瓶中，配制成浓度为100g/L的储备溶液，于冰箱冷冻室中保存。6.3基础营养基溶液按照GB/T15818要求进行配制。7试验步骤7.1试验设计不同类型生物产品降解酚类污染物效果试验设计应符合表1要求。表1生物产品降解酚类污染物效果试验设计项目产品种类微生物产品酶产品处理设计1.供试样品2.失活样品3.空白对照重复次数不少于3次反应条件按正交试验结果确定7.2待测微生物试验实施7.2.1供试样品处理固体产品应进行研磨处理，制成粉末状供试样品。7.2.2失活样品处理取供试的固体或液体

6、微生物样品进行121ºC，30min杀菌处理。7.2.3最佳反应体系确定250ml三角瓶中加入100ml基础营养基溶液，121℃，20min灭菌，冷却。设计正交实验，按照供4GB/T××××—201×试样品的影响因素宜选取反应温度、反应转速、底物浓度、反应时间等，确定最佳反应体系条件。7.2.4降解处理试验取250mL三角瓶9个，空白样3个，供试样品瓶3个，失活样品瓶3个。分别向9个瓶中加入100mL基础营养基溶液，进行灭菌处理后备用。按照最佳反应体系条件进行降解试验。7.3待测酶试验实施7.3.1供试样品处理固体产

7、品应用缓冲溶液溶解。7.3.2失活样品处理用缓冲溶液溶解后的固体样品或液体酶样品在100ºC环境下进行15min去酶活处理。7.3.3最佳反应体系确定250ml三角瓶中加入100ml缓冲溶液，设计正交实验，影响因素宜选取酶量、底物浓度、pH值、反应时间等，确定最佳反应体系条件。7.3.4降解处理试验取250mL三角瓶9个，空白样品瓶3个，供试样品瓶3个，失活样品瓶3个。分别向9个瓶中加入100mL缓冲溶液。按照最佳反应体系进行降解试验。7.4浓度测定正交实验结束后，将菌液在12000r/min，离心10min，取上清

8、液，真空冷冻干燥后，用丙酮或无水乙醇溶解，经0.45μm膜过滤后，按照GB/T2601中的方法测定酚类化合物浓度。8结果分析8.1结果计算降解率按照式（1）计算：D=ρ0-ρ1-ρ0-ρ2-ρ0-ρ'ρ0×100%…………………………..（1）式中：D——底物的降解率（%）；ρ0——为反应开始时的起始底物浓度（mg/L）；4GB/T××××—2