紫花牡荆素对人卵巢癌ho-8910细胞活性氧生成和凋亡的影响

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1、分类号密级UDC编号硕士学位论文紫花牡荆素对人卵巢癌HO-8910细胞活性氧生成和凋亡的影响研究生姓名：唐敏指导教师姓名、职称：谢宛玉教授学科、专业名称：妇产科学研究方向：妇科肿瘤手术学及基础研究2012年5月万方数据南华大学学位论文原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南华大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。作者签名：年月日南华

2、大学学位论文版权使用授权书本人同意南华大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以编入有关数据库进行检索，可以采用复印、缩印或其它手段保留学位论文；学校可根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文。对于涉密的学位论文，解密后适用该授权。作者签名：导师签名：年月日年月日2万方数据目录一、中文摘要……………………………………………………………1二．英文摘要……………………………………………………………3三．正文1．前言…………………………………………………………………62．技术路线………………………………………………

3、……………73．材料与方法…………………………………………………………94．实验结果……………………………………………………………175．讨论…………………………………………………………………266．结论…………………………………………………………………31四．参考文献……………………………………………………………32五．综述…………………………………………………………………34六．硕士期发表论文……………………………………………………41七．附录…………………………………………………………………42八．致谢…………………………………………………………………442万方数据本研究基金资助项目1、

4、湖南省卫生厅科研计划项目NO:C2011-0072、长沙市科技局科研项目NO:K1104060-313、南华大学研究生科研创新基金N0:2010XCX12万方数据紫花牡荆素对人卵巢癌HO-8910细胞活性氧生成和凋亡的影响硕士研究生：唐敏导师：谢宛玉教授中文摘要目的：观察活性氧在紫花牡荆素（Casticin,CAS）诱导的人卵巢癌HO-8910细胞凋亡中的作用，探讨CAS诱导细胞调亡是否涉及活性氧介导的线粒体凋亡诱导信号途径。方法：1.AnnexinV-FITC/PI双染色流式细胞术(flowcytometry，FCM)分析CAS对人卵巢癌HO-8910细胞凋亡的影响；2.H2DCFH-DA探

5、针FCM检测CAS对人卵巢癌HO-8910细胞活性氧生成影响；3.罗丹明123探针(Rhodamine123，Rh123)FCM分析CAS对人卵巢癌HO-8910细胞线粒体跨膜电位的影响；4.Westernblot分析CAS对人卵巢癌HO-8910细胞CytC、Bax、Bcl-2蛋白表达和活性的影响。结果：1.AnnexinV-FITC/PI双染色FCM分析结果显示CAS(2.0和4.0μg/mL)处理人卵巢癌HO-8910细胞48小时的细胞凋亡率分别为：9.46±0.95%，14.47±1.47%(p﹤0.01），明显高于10mmol/LN-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cystein

6、e，NAC)预处理组(4.63±0.57%，5.30±0.50%)（p﹤0.01），及溶媒对照组（DMSO，0.3±0.10%）；1万方数据2.H2DCFH-DA荧光探针FCM分析结果表明CAS(2.0和4.0μg/mL)处理48小时的人卵巢癌HO-8910细胞H2DCFH-DA平均荧光强度分别为：36.73±1.52，57.53±2.83；明显高于联合NAC(10mmol/L)预处理细胞的平均荧光强度（13.63±1.25，14.63±1.60(P<0.05)）；3.Rh123探针标记FCM分析细胞内线粒体膜电位结果表明，CAS(2.0和4.0μg/mL)处理48小时的人卵巢癌HO-8910

7、细胞Rh123平均荧光强度分别为12.73±1.25、18.20±1.49，明显低于NAC(10mmol/L)预处理组平均荧光强度（56.20±2.73，59.7±1.79），及溶媒对照组（0.2%DMSO，84.67±3.73）（P<0.01）；4.Westernblot分析结果显示经CAS(2.0和4.0μg/mL)处理48小时的人卵巢癌HO-8910细胞后CytC、Bax蛋白表达上调，平均相