植物生物学实验试卷及参考答案-厦门大学精品课程建设网站

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1、厦门大学《植物生物学实验》课程试卷生命科学学院生物系2002年级生物科学专业主考教师：叶庆华试卷类型：（A卷/B卷）请您通过《植物生物学实验》学习后，结合有关实验操作训练、观察及结果，回答下列问题（每题25分）：1．以实验观察到的材料为例，阐述颈卵器植物配子体和孢子体形态结构的演化途径及其意义。2．怎样提高环境样品的测定与分析准确性?3．植物组织培养和遗传转化的理论依据分别是什么？4．称取1g叶片和0.3g花瓣，用5mL提取液分别提取它们的SOD粗酶液，在3mL反应体系中加入10μL粗酶液反应20min后测得OD分别为：叶片花瓣未加酶液对照OD0.3720.4050.727以NBT

2、的还原刚好被SOD抑制50%时加入的SOD酶量为一个酶活单位，请分别计算叶片和花瓣的SOD酶活性。3附参考答案：1、答:苔藓植物蕨类植物裸子植物孢子体孢子体没有根、茎、叶分化，分化为孢蒴，蒴柄和基足三部分。孢子体有根、茎、叶分化，根为不定根，茎为根状茎。孢子体有根、茎、叶分化，多为多年生高大乔木，具发达的直根系。配子体配子植物体繁殖时由配子植物体＋雌、雄器托（苞），颈卵器（精子器）再分别着生在雌、雄器托（苞）上，配子植物体（原叶体）繁殖时，颈卵器（精子器）直接着生在原叶体，雌配子体已简化为胚囊，位于珠心组织中，颈卵器简化只有2~4个颈壁细胞露在外面，其余都埋藏在胚囊内只有一个卵细胞

3、和一个腹细胞，无颈沟细胞，比蕨类植物颈卵器明显简化；裸子植物雄配子体也相当简化，通常在3～4个细胞时就从花粉囊内散出，成熟雄配子体也只有几个细胞，比起蕨类植物精子器已相当简化总之，由苔藓植物进化到蕨类植物再到裸子植物，孢子体逐渐发达，配子体逐渐简化，以至基本退化消失。2、答：从样品采集、保存、预处理和分析等环节把关。采集过程中应注意样品的代表性、重复性和样品采集数量，合理的采样策略是准确分析的前提，并做好采样记录。保存和预处理过程应该注意样品的时效。在分析过程中，可以通过：测定重复、设置标准样等环节提高分析准确性。在所有过程中，应该时刻注意避免污染（包括交叉污染）、规范操作等问题。

4、3、答：组织培养：植物细胞全能性，是指一个生活细胞具有产生完整生物个体的潜在能力称为植物细胞的全能性。遗传转化：(1)植物的遗传转化方法包括基因枪、花粉管导入法以及农杆菌介导的遗传转化等多种方法。其中农杆菌介导的遗传转化法是最常用的一种方法。(2)根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens),它含有Ti质粒,能诱导被侵染的植物细胞形成肿瘤,即诱发冠瘿瘤。根癌农杆菌Ti的致瘤过程需要如下条件：l植物的损伤信号及环境因子3植物损伤信号（糖类和酚类化合物）可指导农杆菌对植物细胞的趋化性移动，并可诱导农杆菌Vir基因的表达。受伤植物细胞释放的化学诱导信号中最强的一类为酚类

5、化合物，如乙酰丁香酮。l菌体的识别和附着位点在植物细胞壁上存在着由碳水化合物、蛋白质和果胶组成的农杆菌附着的受体位点，位于完整细胞的表面。在农杆菌细胞壁上也存在着吸附到植物细胞壁的结合位点，由位于细菌外膜的蛋白质和脂多糖构成。农杆菌附着到植物细胞上后，分泌出果胶酶等物质，消化植物细胞壁，从而形成农杆菌侵入植物细胞的通道。lTi质粒的必需组成元件，包括T－DNA区域和致毒基因(Virgene)Ti质粒为160～250kb的大质粒，包括毒性区(Vir区)、结合转移区(Con区)、复制起始区(Ori区)和T-DNA区4部分，其中与冠瘿碱生成有关的是Vir区和T-DNA区。前者大小为30k

6、b，分virA-J等至少10个操纵子，决定了T-DNA的加工和转移过程。T-DNA可以将携带的任何基因整合到植物基因组中，但这些基因本身与T-DNA的转移和整合无关，仅左右两端各25bp的同向重复序列为其加工所必需，其中14bp是完全保守的，分10和4bp不连续的两组，两边界中以右边界更为重要。l位于根癌农杆菌染色体上的一些其他遗传座位。（3）双元表达载体系统主要包括两个部分一部分为卸甲Ti质粒，这类Ti质粒由于缺失了T－DNA区域，完全丧失了致瘤作用，主要是提供Vir基因功能，激活处于反式位置上的T－DNA的转移。另一部份是微型Ti质粒(Mini-Tiplasmid)，它在T－D

7、NA左右边界序列之间提供植株选择标记如NPTII基因以及LacZ基因等。双元载体系统的构建的原理是Ti质粒上的Vir基因可以反式激活T－DNA的转移。与共整合载体所不同的是，它不依赖两个质粒之间的同源序列，不需要共整合过程就能在农杆菌内独立复制。4．答：光照反应OD560叶片SOD酶活性：（0.727-0.372）X5000=489.65U/g叶片鲜重0.727X50%X10X1花瓣SOD酶活性：（0.727-0.405）X5000=1476.39U/g叶片鲜重0.7