鸡f2资源群的冠型性状微卫星标记连锁分析

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1、精品论文鸡F2资源群的冠型性状微卫星标记连锁分析1赵洁，梁杜，王金富，李岩，张成先，赵燕，廖和荣石河子大学动物科技学院，新疆石河子(832003)E-mail:liaoherong@tom.com摘要：【目的】构建具有冠型性状记录的鸡F2资源群的2号染色体连锁图谱，并结合表型分析对调控鸡冠型性状的基因进行初步定位。【方法】通过测交选择豆冠冠型基因型纯合的吐鲁番斗公鸡2只和玫瑰冠冠型基因型纯合的玫瑰冠母鸡6只为亲本采用F2代实验设计建立F2代资源群436只，参考EL鸡遗传连锁图谱，在鸡2号染色体上筛选14对微卫星标记，运用MapMaker/EXP3.0软件

2、构建2号染色体连锁图谱，LOD记分法进行鸡冠型基因连锁分析。【结果】经χ2检验，F2资源群冠型分化比例符合经典遗传学孟德尔独立分离规律。在连锁分析中除MCW0157外，其余13个微卫星标记能够连锁,所构建的鸡2号染色体连锁图谱与EL鸡遗传连锁图谱相似。【结论】2号染色体上MCW0082位点与玫瑰冠冠型基因可能存在连锁。关键词：鸡F2资源群；冠型性状；微卫星标记；鸡2号染色体连锁图；连锁分析0.引言【研究意义】冠型为家禽品种特别是鸡的重要特征之一，不同鸡的品种其冠形有各自的特点和形状；常见鸡的冠形有单冠、豆冠、玫瑰冠、胡桃冠等[1]。目前各配套系商品种鸡均

3、为单冠，二十世纪五、六十年代我国的许多地方品种中都有玫瑰冠和豆冠冠型的鸡，由于大量引进国外蛋用和肉用配套系单冠鸡，造成我国的这些地方品种鸡濒临灭绝，如吐鲁番斗鸡等部分地方品种鸡已被例入国家级畜禽遗传资源保护名录[2,3]。通过冠型性状的连锁分析，可为更好地利用家禽的地方品种遗传资源和冠型基因定位提供科学的参考依据。【前人研究进展】冠型性状是质量性状，由P基因（豆冠）和R基因（玫瑰冠）两对互作基因控制且遵循孟德尔独立分配规律的遗传方式，单冠（pprr）为双隐性，豆冠（P_rr）和玫瑰冠（ppR_）显性于单冠，胡桃冠（P_R_）由P基因和R基因互作形成，豆冠

4、、玫瑰冠和胡桃冠统称为复冠或双冠。用豆冠冠型基因纯合的鸡与玫瑰冠冠型基因纯合的鸡杂交的F1代全为胡桃冠，F1代互交产生的F2代则分化出四种冠型，分别为胡桃冠、玫瑰冠、豆冠和单冠，其分化比例为9∶3∶3∶1[4]。【本研究切入点】本实验利用石河子大学动物科技学院培育的基因型纯合的吐鲁番豆冠斗鸡（♂）和玫瑰冠鸡（♀）为杂交亲本建立F2代资源群，选择14对微卫星标记构建鸡2号染色体的连锁图，并结合冠型性状的表型对鸡的冠型基因进行连锁分析。【拟解决的关键问题】初步定位调控鸡冠型性状的基因。1.材料与方法1.1F2代资源群的建立1.1.1亲本的选择根据测交原理（图

5、1）选择冠型基因型纯合的豆冠斗鸡和玫瑰冠鸡作为亲本。1本课题得到国家自然科学基金项目(30560101)，石河子大学重点科技攻关项目(ZDGG200502)的资助。-6-精品论文-6-精品论文豆冠P_rr（待测）×单冠pprr玫瑰冠ppR_（待测）×单冠pprr-6-精品论文-6-精品论文若后代5只以上全为豆冠，则待测豆冠鸡的基因型为PPrr，为纯合基因型。若后代同时出现单冠和豆冠，则待测斗鸡的基因型为Pprr，为杂合基因型。若后代5只以上全为玫瑰冠，则待测玫瑰冠鸡的基因型为ppRR，为纯合基因型。若后代同时出现单冠和玫瑰冠，则待测玫瑰冠鸡的基因

6、型为ppRr，为杂合基因型。-6-精品论文图1亲本测交模式图Fig.1Theideographofparenttestcross1.1.2F1代的建立以豆冠冠型基因型纯合的斗公鸡为父本和玫瑰冠冠型基因型纯合的玫瑰冠母鸡为母本杂交产生F1代，F1代的冠型均为胡桃冠。1.1.3F2代的建立选用F1代胡桃冠鸡互交产生F2代鸡资源群，F2代中胡桃冠∶豆冠∶玫瑰冠∶单冠=9∶3∶3∶1。1.2血样采集采集亲本8只（豆冠冠型基因型纯合的吐鲁番斗公鸡2只和玫瑰冠冠型基因型纯合的玫瑰冠母鸡6只）、F1代14只（公6只和母8只）和F2代436只（胡桃冠269只、玫瑰冠69

7、只、豆冠73只和单冠25只）共458只鸡的血样，ACD抗凝，－20℃保存备用。1.3微卫星引物的选择与合成根据网站http://www.ncbi.nlm.nih.gov/和http://www.thearkdb.org/arkdb/do/getChromosomeDetails?accession=ARKSPC00000004公布的微卫星标记信息和3个参考家系图谱及整合图谱,选取鸡2号染色体上14对微卫星引物（表1），引物由上海生工生物工程技术服务有限公司（Sangon）合成。表1微卫星引物的信息Table1Theinformationofmicrosa

8、telliteprimer标记名位置（cM）产物大小引物序列（5’→3’）退火温