转玉米pepc基因小麦和六倍体小黑麦新种质的分子细胞学鉴定研究

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1、MoLECULARANDCYToLoGICALIDENTIFICATIoNoFTHETRANSGENICWHEATEXPRESSINGAMLAIZEPEPCGENEANDWHEABRYEDERITn厂ESWITHBIGEARByJianHongZhangNanjingAgriculturalUniversityInPartialFulfillmentoftheRequirementfortheMasterDegreeSupervisedByProfessorWeigangXuandProfessorHanXingCollegeofAgronomyNanjingAgricultural

2、UniversityNanjing，P．R．ChinaMay2012原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者(需亲笔)签名：学位论文版权使用授权书年月日本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南京农业大学可以将本学位论文的全部

3、或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密口，在一年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密函(请在以上方框内打“√”)学位论文作者(需亲笔)签名：衫括逮钇形桫年少月必日导师(需亲笔)签名：≯膨年，月才日旦茎．——_———————————————————一。目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·IABSTRACT⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯III缩略语⋯⋯．第一章文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11

4、．1转玉米C4型高光效雎PC基因小麦的分子特征鉴定及光合特性研究⋯⋯⋯”11．1．1提高光能利用率与增加产量的关系⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·l1．1．2C4光合作用途径与C3光合作用途径的比较⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一21．1．3引入C4光合途径提升C3作物产量潜力的可行性分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．51．1．4C4途径关键酶基因朋PC的分子生物学研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯71．1．5高光效转基因植物的分子检测与鉴定技术⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．91．2小麦．黑麦大穗型衍生后代分子细胞学鉴定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．111．2．1小黑麦合成⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯111．2．2小麦染色体工程⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。111．2．3六倍体小黑麦合成及其在小麦遗传育种中的应用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯121．2．4外源遗传物质鉴定技术⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯131．3研究目的意义及创新点⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．151．3．1研究目的与意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯151．3．2研究的创新点⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯161．4技术路线⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．161．4．1转玉米C4型高光效脚C基

6、因小麦后代株系鉴定及筛选⋯⋯⋯⋯⋯⋯．161．4．2小麦-黑麦大穗型衍生后代分子细胞学鉴定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．17第二章转玉米C4型高光效胱基因小麦的分子特征鉴定及光合特性研究⋯．192．1材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯202．1．1供试材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯202．1．2T3代转基因株系PCR检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．212．1．3T3代转基因株系的Southern杂交检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一222．I．4T3代转基因株系的实时荧光定量PCR分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．262

7、．1．5T3代转基因株系的Western杂交⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯282·1·6T3代转基因株系的PEPC酶活性测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29—————————j蔓墅坠丝塑曼苎垦尘耋塑查鱼!!尘墨耋堑壁堕丝坌王塑丝堂鳖塞型壅2·1·7T3代转基因株系的净光合速率测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。302·1·8产量性状分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯302．2结果与分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯