松针叶绿素-胡萝卜软膏对实验性大鼠胃溃疡的防治作用及其机制

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1、Securityclassification：publicNumber：20091434TheeffectofChlorophyll--carotenePastefromPineNeedlesonexperimentalgastriculcerinratsanditsmechanismADissertationSubmittedfortheMaster’SDegreeCandidate：LiJiaoAdviser：Prof．LiHaitaoNanjingUniversityofChineseMedicine，Nanjing，China学号：20091434

2、硕士学位论文松针叶绿素．胡萝I＼素软膏对实验性大鼠胃溃疡作者姓名李骄指导教师姓名李海涛学科专业药理学的防治作用及其机制申请学位级别医学科学硕士学位职称教授研究方向心血管系统学习时间自2009年9月11日起至2012年6月30日止论文提交日期2012年4月5日论文答辩日期2012年5月3日学位授予单位南京中医药大学学位类型医学科学硕士学位原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在

3、文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者(需亲笔)签名：锄功1分年6月，口日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南京中医药大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密口，在年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密口。(请在以上方框内打“^，")矗店学位论文作者(需亲笔)签名：椭铀I乍年‘月fD日}导师c需亲笔)虢劫跨

4、加胁年乡肋日目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．IABSTRACT⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯IlI前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．1刖罱⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．1第一部分松针叶绿素一胡萝I、素软膏急性毒性试验⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．3第二部分松针叶绿素一胡萝I、素软膏抗实验性大鼠胃溃疡作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7第三部分松针叶绿素一胡萝I、素软膏体外抗幽门螺杆菌(HP)研究⋯⋯⋯⋯⋯23第四部分松针叶绿素一胡萝I、素软膏抗HP感染型实验性大鼠胃溃疡作用⋯⋯⋯．27第五部分松针叶绿素一胡萝

5、I、素软膏抑制胃癌细胞胃泌素RNA表达⋯⋯⋯⋯．．39结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．46展望⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯47参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．48综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．51攻读硕士学位期间取得的学术成果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯64致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．65南京中医药大学硕士学位论文摘要目的：研究松针叶绿素．胡萝卜素软膏对实验性大鼠胃溃疡的防治作用，为松针药用价值的进一步开发提供理论依据和实验基础。方法：(1)通过小鼠急性毒

6、性试验，初步评价其安全性。(2)将大鼠随机分为5组，分别为模型对照组(蒸馏水7．5ml／kg)、奥美拉唑对照组(O．0189／kg)和松针叶绿素一胡萝卜素软膏(0．75、1．5、2．259／kg)组，各组每天给药一次，连续5天或7天。通过大鼠幽门结扎型、乙醇烧灼型和乙酸浸润型胃溃疡模型，观察松针叶绿素．胡萝卜素软膏对各组大鼠胃粘膜损伤情况，溃疡面积，溃疡抑制率，胃液量、胃液pH值及胃蛋白酶活性，以及各组大鼠胃粘膜病理变化的影响。(3)通过倍比稀释法观察针叶绿素．胡萝卜素软膏对幽门螺杆菌(Helicobacterpylori，Up)的体外抗菌作用，分别用最低

7、抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)表示抗菌活性。(4)通过建立Up合并乙醇烧灼型大鼠胃溃疡模型，结合测定溃疡面积，计算溃疡抑制百分率，检测血清和胃组织SOD、MDA、PGE2和GAS的含量，进一步观察和探讨松针叶绿素．胡萝卜素软膏的抗溃疡作用和机制。(5)最后用原始体积分数为10％、20％、40％的松针叶绿素一胡萝卜素软膏(2．259／kg)灌胃大鼠含药血清，通过Real．timePCR和荧光素酶报告基因分析，从基因水平证实松针叶绿素一胡萝卜素软膏对胃泌素的调控。结果：(1)松针叶绿素．胡萝卜素软膏经口给药，小鼠最大耐受量(maximumtoler

8、abledose，MTD)为20．09／kg，说明其半数致死量(m