微透析技术在颅脑损伤中的应用

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5、、微量注射器、透析探头(MicrodialysisProbe，MDP)、连接管和收集小瓶组成。必要时可有探针销、固定螺栓和收集器（计算机控制）。其基本原理是采用具有一定截留分子量的纤维半透膜制成极细的探头，将探头刺入待测的组织区域内，以恒定速度向探头内灌注与组织液成分相近的等渗灌流液，当灌流液流经探头前端透析膜时，位于探头膜外侧的组织内较小分子量生物活性物质（分子量6－100kda,多为20kda）将顺浓度梯度从膜外扩散入膜内一并随灌流液被引流出探头外，以一定的时间间隔有序地接收透析液，并采用高灵敏度化学检测系统连续检测收集的透析液中

6、待测生物活性物质浓度，便可监测活体动物或人体特定组织区域内细胞外生物活性物质浓度随时间改变的动态变化。由于该技术具有对组织损伤小、取样少、方便、快捷、可连续监测且易实现自动化等优点，在国外已被广泛应用于各个基础医学研究领域。灌流液多为生理盐水、林格氏液或人造脑脊液。由于透析管中的灌流液不断流动更新，因此跨膜浓度梯度始终存在，微透析得以持续进行。2、影响微透析技术的因素　　　微透析回收率是指所要透析的物质在灌流液中的浓度与组织间液中的该物质的浓度之比，是衡量微透析效率的主要指标。影响回收率的因素有：①微透析探针膜面积，膜面积越大，回收率

7、越高；②灌流速度，它与回收率成反比，一般设定为2μl/min；③探针在组织中滞留时间，随时间延长回收率会减低。每个微透析探针均须在体外检测其对不同分析物的回收率。由于探针的回收率是相对恒定的，因此在临床上每做5次微透析后可进行一次回收率检测。3、微透析技术在实验性颅脑损伤研究中的应用　　国外学者应用微透析技术对大鼠颅脑损伤模型的脑组织间液进行生物化学采样，通过高灵敏度的微量化学分析技术如高效液相色谱法等对其中的各项生化指标进行检测和分析。其中研究最多的是兴奋性氨基酸，其次是糖、乳酸、丙酮酸等糖代谢指标。　　　3．1兴奋性氨基酸　　大鼠

8、脑组织间液中的谷氨酸、天门冬氨酸和牛磺酸等均在颅脑损伤后成倍的增高，其中研究最多的是谷氨酸，该指标在伤后20－30分钟上升达到高峰，在30－60分钟后降至基础水平。如果颅脑损伤伴缺氧，则大鼠脑组织间液中的谷氨酸水平升高的