按摩对兔股四头肌损伤修复的初步研究

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1、重庆医科大学硕士学位论文按摩对兔股四头肌损伤修复的初步研究姓名：侯懿烜申请学位级别：硕士专业：针灸推拿学指导教师：唐成林201205重庆医科大学硕士研究生学位论文按摩对兔股四头肌损伤修复的初步研究摘要目的：研究兔股四头肌经外力重物损伤后，按摩对受损股四头肌损伤修复的分子病理、形态结构变化，受损肌组织微循环重建，肌细胞骨架相关蛋白一0c．肌动蛋白(0c．Actin)和结蛋白(Desmin)的表达及细胞骨架重构，骨骼肌能量代谢相关的酶活性影响，旨在探讨按摩促进骨骼肌组织损伤修复的生理、生化分子生物机制。方法：健康成年雄性新西兰大白兔33只，体重(2

2、．O士o．5)蚝，随机分为3组，正常对照组(N组，n=3)、自然恢复组(SR组，n=18)和按摩组(M组，n=12)。根据造模后观察时间的不同，SR组分为自然恢复7d组(SR7组，n：3)、自然恢复14d组(SRl4组，即按摩7d对照组，n=6)和自然恢复21d组(SR21组，即按摩14d对照组，n_6)3个亚组；M组分为按摩7d组(M7组，n一6)和按摩14d组(M14组，n：6)2个亚组。N组实验动物不作任何处理，作为正常对照；SR、M组实验动物用自制打击器制备兔右后肢股四头肌损伤模型。M组于造模后第8天用R1Ⅲ2智能按摩器行按摩治疗，按摩

3、转速3000～3100r／min，按摩时间15血n，每天1次至处死取材为止；SR组不予按摩。SR、M组于伤后14d及2ld，用飞利浦iu22高端彩超诊断仪对受损的股四头本课题由重庆市教委科学技术研究项目(1u100307)资助3重庆医科大学硕士研究生学位论文肌进行常规和超声微泡影像学检查。随后各组实验动物经空气栓塞法处死，取股四头肌组织样本经H&E染色观察组织病理变化；免疫组织化学染色、W．estemBlot检测Desmin、0c—Actin表达，并观察肌纤维骨架结构；酶组织细胞化学法检测ATPase、SDH、AChE酶活性。随机选取上述各组切

4、片各5张，镜检照相，每组切片至少记录10个视野评价损伤修复状况、计数MEP；并选取100个肌纤维，NIS—E1ementsBR3．2图像分析软件测定肌纤维截面积与直径；ImageProPlus6．0图像分析软件测量并计算SDH深染I型肌纤维目标面积，SDH深染肌纤维、ATPase阳性肌纤维积分光密度(OD)。数据采用SPSSl7．0统计软件进行单因素方差(One．、ⅣavANOVA)分析，多组之间均数的两两比较采用LSD—t检验。组间差异采用t检验，尸<0．05差异有统计学意义，尸<0．01差别具有显著意义。结果：SR、M组实验动物均存活至实验

5、完成。N组肌纤维形态规整，排列整齐，无结缔样组织。SR组股四头肌组织标本见明显组织坏死，多数肌肉纤维断裂、萎缩、排列紊乱；M组骨骼肌组织形态、肌肉萎缩较SR组改善，受损部位可见新生肌细胞。超声影像检测发现SR组受损股四头肌可见弥散、非均一的弱声波反射，M组比SR组见明显的功能性新生毛细血管形成、微循环的重建。酶组织化学染色显示：各时间点M组较SR组受损股四头肌乙酰胆碱酯酶活性、MEP数目和MEP平均截面积随按摩周期的增加逐步增高；SDH深染I型肌纤维百分含量、SDH酶和K+一Na+一ATPase酶活性都明显增加(P<0．01)，并几乎接4重庆医

6、科大学硕士研究生学位论文近正常股四头肌肌组织水平；免疫组织化学染色显示SR组0c—Actill、Desmin染色浅，肌纤维骨架结构纹理紊乱，0c。Actm、Desmin表达明显低于N组(尺0．05)；M组各时间点0c—Actin、Desmin所显示的细胞骨架纹理结构逐步恢复，仪一Actin、Desmin表达均较SR组增强(P<0．05)，且M14d组明显高于M7d组(P<0．05)；Wreste加blot检测证实免疫组织化学染色结果。结论：按摩可能通过促进受损股四头肌组织毛细血管的形成、微循环的重建，改善血供，增强有氧代谢相关的酶活性，改善肌细

7、胞有氧代谢相关功能；按摩还通过上调股四头肌肌纤维细胞骨架损伤修复相关的基因表达、促进受损骨骼肌肌纤维细胞骨架重构，修复肌组织的形态，阻止肌纤维退变萎缩。关键词：按摩；骨骼肌损伤修复；微循环；代谢酶：细胞骨架蛋白PRELIMINARYSYUDY0FMASSAGEONREPAIRING0FINJUREDQUADRICEPSFEMORISMUSCLEO岣ective：ABSTRACTT0investigatetheeffectofmassageoni啊uredrabbitquadricepsfemorisandtrytounderstandthepo

8、ssiblemolecularmechanismofmassageinrepairingofskeletonmusclei啊ury．W．eanalyz