化瘀固本方对慢性盆腔炎模型大鼠粘连相关细胞因子作用及机制研究

化瘀固本方对慢性盆腔炎模型大鼠粘连相关细胞因子作用及机制研究

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时间:2019-02-21

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1、湖北中医药大学博士学位论文化瘀固本方对慢性盆腔炎模型大鼠粘连相关细胞因子作用及机制研究姓名:刘彤鸥申请学位级别:博士专业:中医内科学指导教师:益晋文20120529中文摘要目的:通过生物致炎剂注入法建立CPID大鼠模型,观察化瘀固本方和康妇炎胶囊对CPID模型大鼠的对比研究,观察CPID模型大鼠盆腔内生殖器官变化,在光镜下观察左侧输卵管病理形态学变化。S-P法检测TGF—p1、EGF免疫组化表达、Real-timePCR法检测ICAM-lmRNA、TNF-O【mRNA表达及westernblot法检测NF-kB蛋白测定,来探讨化瘀固本方对CPID模型大鼠的治疗作用及机制。方法:

2、1、用生物致炎剂和化学致炎剂分别诱导3组CPID大鼠模型,以检验模型的建立成功并进行筛选,为化瘀固本方治疗CPID模型大鼠奠定实验模型基础。2、将40只成年未孕sD雌性大鼠随机分为空白组、模型组j化瘀固本组、康妇炎组。生物致炎剂官腔注入法造模后第21天即分组灌胃给药,灌胃14天后肉眼观察盆腔内生殖器官变化并评分,在光镜下观察左侧输卵管病理形态学变化并评分。3、灌胃14天后,于近子宫处摘取左侧部分输卵管,取材标本液氮罐保存,以S-P法检测CPID模型大鼠TGF-p1、EGF免疫组化的表达水平。4、灌胃14天后,于近子宫处摘取左侧部分输卵管,取材标本液氮罐保存,以Real-time

3、PCR法检测CPID模型大鼠ICAM-lmRNA、TNF—O【mRNA的表达水平。5、灌胃14天后,于近子宫处摘取左侧部分输卵管,取材标本液氨罐保存,以Westernblot方法检测CPID模型大鼠NF-kB蛋白表达水平。结果:1、生物致炎剂注入法以常见的CPID致病病原微生物作为致炎剂来制作动物模型,见子宫及左侧输卵管炎性充血、红肿,表面均有炎性渗出,部分呈粘液状,左侧输卵管明显增粗、弯曲,与子宫表面有少许膜样粘连,典型的慢性盆腔炎症状出现。2、模型组大鼠的盆腔内生殖器官评分水平、左侧输卵管病理形态学评分水平与空白组比较有极显著性有差异(P<0.oi),化瘀固本方组与模型组比

4、较差异有极显著性(pO.05)。3、CPID模型大鼠输卵管组织中TGF—p1、EGF的表达明显降低,化瘀固本方干预后检测有明显升高趋势,其表达调节作用优于康妇炎组。4、CPID模型大鼠输卵管组织中ICAM-ImRNA、TNF-O【mRN的表达显著升高,化瘀固本方能下调CPID模型大鼠的输卵管组织中ICAM-ImRNA、TNF-C【mRNA的表达,相对于康妇炎组有较强优势。5、CPID模型大鼠输卵管组织中NF-kB蛋白表达明显增加,化瘀固本方药物干预后NF-kB蛋白表达水平有降低趋势,并优于康

5、妇炎组。减轻了CPID模型大鼠输卵管组织的炎性程度。结论:化瘀固本方可通过对CPID模型大鼠输卵管组织的粘连相关细胞因子的调节,抑制其启动多种细胞因子的转录及表达,有效抑制盆腔炎模型大鼠炎症,减轻了CPID模型大鼠盆腔及输卵管组织的炎性程度,改善了解盆腔粘连,改善机体免疫功能。活血化瘀、清利湿热药物对粘连相关细胞因子的调节明显优于康妇炎组,其在改善慢性盆腔炎症粘连的免疫调节方面表现出优势。关键词:化瘀固本方;慢性盆腔炎;TGF-131;EGF;ICAl

6、卜1;TNF一仅;NF—kBFavorremovingstasisformulatoremovethechroniCpeIVi

7、CinfIamatorydiseaseratmodeIofadhesiontotheroIeandmechanismofcytokiReSpeciaIity:TraditionaImediCiReAuthor:LIUTongouTutor:ProfessorTUJinwenAbstractObjectire:Throughthebiologica1causeinflammationinjectingmethodtoestablishtheCPIDratmodel,toobservethewettoremovepartyandkangfuburningcapsuleonCPIDm

8、odelofthecomparisonoftheratS,observationCPIDmodelratSinsidepelvicreproductiveorganschangesinlight—microscopyleftfallopiantubepathologicalmorphologychange.S-PmethodtodetectTGFp1,EGFimmunohiStochemica1expresSion,Rea卜timePCRmethodtodetectICAM一1mRNA,TN

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