环境生物学实验技术

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1、环境生态学实验实验一、水体初级生产力的测定一、实验内容：通过测定水体浮游植物叶绿素a含量，表征水体初级生产力大小；同时，水体因受氮、磷的污染，导致浮游植物旺盛生长，使水体呈现富营养化，此类水体叶绿素a浓度常大于10µɡ/L，因此，本实验通过测定不同水体中浮游植物叶绿素a浓度，可判断水体营养状况。二、目的要求：通过实验，掌握通过测定叶绿素a来判断水体初级生产力大小及水体营养状况的方法与原理。三、实验地点：学校求索溪与莲心湖四、实验方法与步骤：（一）器材1、分光光度计（波长选择大于750nm，精度为0.5～2nm）2、比色杯（1cm）3、台式离

2、心机（3500r/min以上）4、离心管（15mL具刻度和塞子）；冰箱5、匀浆器或小研钵6、真空抽滤装置；滤膜（0.45µm，直径50mm），真空泵（最大压力不超过300kPa）7、MgCO3悬液：1gMgCO3细粉悬浮于100mL蒸馏水中8、90％的丙酮溶液：90份丙酮＋10份蒸馏水9、水样：两种不同污染程度的水样（二）方法和步骤1、清洗玻璃仪器整个实验中所使用的玻璃仪器应全部用洗涤剂清洗干净，避免酸性条件引起叶绿素a分解。2、过滤水样在蔡氏滤器上装好滤膜，取两种湖水各50～500mL减压过滤。待水样剩余若干mL之前加入0.2mLMgCO

3、3悬液，摇匀直至抽干水样。加入MgCO3可增进藻细胞滞留在滤膜上，同时还可防止提取过程中叶绿素a被分解。如果过滤后的载藻滤膜不能马上进行提取处理，则应将其置于干燥器内，放冷暗处4℃保存，放置时间最多不能超过48h。3、提取将滤膜放于刻度离心管中，加90％丙酮于离心管中至总体积为10mL。塞紧塞子并在管子外部罩上遮光物，充分振荡，放入冰箱内避光提取18～24h。4、离心提取完毕后，置刻度离心管于台式离心机上（3500r/min）离心10min取出离心管。5、测定光密度藻类叶绿素a具有其独特的吸收光谱（663nm），因此可用分光光度法测其含量。

4、用移液管将离心管上清液移入1cm比色杯中，以体积分数90％的丙酮溶液作为空白，分别在750nm、663nm、645nm、630nm波长下测提取液的吸光度D。注意：样品提取液的D663要求在0.2与1.0之间，如不在此范围内，应调换比色杯，或改变过滤水样量。D663小于0.2时，应改用较宽的比色杯或增加水样量；D663大于1.0时，可稀释提取液或减少水样滤过量，使用1cm比色杯比色。6、叶绿素a浓度计算其中：——水样体积（L）；——提取液定容后的体积（mL）；——吸光度；——比色皿光程（cm）五、作业：将测定结果记录于下表中：藻类叶绿素测定结

5、果水样D750D663D645D630A水样B水样根据测定结果，参照下表中指标评价被测水样的富营养化程度。湖泊富营养化的叶绿素评价标准指标类型贫营养型中营养型富营养型<44～1010～100实验二、水生态系统观察与分析一、实验内容：水生态系统的组成、结构，水生态系统的物质和能量动态。二、目的要求：通过实验，深刻理解生态系统的概念，掌握生态系统观察与分析的基本方法。三、实验地点：学校莲心湖。四、观察内容与方法：根据生态系统的概念，观察对象是否一个生态系统？如果是，观察分析：1、生态系统的边界的确定（边界的确定以系统内外区别明显和利于研究为原则

6、）；2、生态系统的组成生产者：消费者：还原者：3、生态系统的结构垂直结构（从水面水底）：水平结构（从塘边中央）：4、生态系统的物质输入和输出物质输入：物质输出：5、生态系统的能量输入和输出能量输入：能量输出：五、作业：整理观察与分析结果，提交实验报告。课后思考与联系1．试设计一个微型的正常运行的生态系统。