产kpc型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌分子分型及传播机制研究

《产kpc型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌分子分型及传播机制研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、浙江大学博士学位论文产KPC型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌分子分型及传播机制研究姓名：齐艳申请学位级别：博士专业：临床检验诊断学指导教师：俞云松201205浙江大学博士学位论文中文摘要产KPC型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌分子分型及传播机制研究浙江大学医学院博士研究生导师临床检验诊断学齐艳俞云松教授中文摘要肺炎克雷伯杆菌属革兰阴性杆菌，常存在于人体上呼吸道和肠道，当机体抵抗力降低时可引起肺部感染、泌尿道感染、甚至血液感染等。肺炎克雷伯菌引起的医院感染率近期逐年增高，已成为临床分离及医院感染的重要致病菌之一．碳青霉烯类抗生素是抗菌谱最广，抗菌活性最强的

2、一类p．内酰胺抗生素，因其具有对13．内酰胺酶稳定以及毒性低等特点，已经成为治疗严重细菌感染最主要的抗茵药物之一．但是，随着碳青霉烯类抗生素在临床上使用的增加，碳青霉烯类抗生素的耐药性也不断增加。近年来，碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌(carbapenem-resistantEnterobacteriaceae，CRE)呈世界性流行，在我国流行情况也日益严重。其耐药的重要机制就是细菌产生碳青霉烯酶(carbapenemhydrolyzingIB-lactamases，carbapenemases)。碳青霉烯酶是指能分解包括碳青霉烯类抗生素在内

3、的几乎所有13内酰胺类抗生素的一大类13内酰胺酶，包括Ambler分子分类中的A类、B类、D类3类酶【2，31，其中A类酶大多数能被克拉维酸抑制，属于Bush分类中的2f亚群，主要见于肠杆菌科细菌，近来也在非发酵菌中有报道。KPC(Klebs&llapneumoniaecarbapenemase，KPC)型碳青霉烯酶属于功能分类法的2f组，分子分类法的A类，是一种由质粒介导的丝氨酸3-内酰胺酶，以丝氨酸作为活性位点，是目前引起肠杆菌科细菌对碳青霉烯类耐药的重要原因。自2001年美国首次报道第一株产KPC酶肺炎克雷伯菌后，产KPC型碳青霉烯

4、酶肺炎克雷伯菌在全球范围快速播散，且在世界各地多个医院报道出现院内爆发流行。现已报道过产KPC酶肺炎克雷伯菌的国家横跨美洲、欧洲和亚洲等十几IT浙江大学博士学位论文中文摘要个国家和地区。此外，菌种也不再局限于肺炎克雷伯茵中，产KPC酶的其他肠杆菌科细菌日益增多，包括产酸克雷伯菌、大肠埃希菌、阴沟肠杆菌、肠炎沙门菌古巴血清型、弗劳地枸橼酸杆菌、粘质沙雷菌和奇异变形杆菌等，最近甚至还在铜绿假单胞菌、荧光假单胞菌和鲍曼不动杆菌等非发酵细菌中也发现了该酶。由于产KPC酶细菌对临床应用的青霉素类、头孢菌素类、碳青霉烯类以及氨曲南等多种抗生素耐药，以

5、及常常同时携带有其他耐药基因，因此多重耐药菌株的不断增加常导致临床抗菌药物治疗的失败和病程迁延，给临床治疗带来严峻挑战。国内外研究发现，KPC酶的快速传播与其编码基因定位在转座子移动元件上密切相关，推测产KPC酶菌株在医院范围内广泛播散的机制主要通过水平传播和克隆传播两种形式导致医院感染暴发流行的发生。因此，急需成功有效的院内感染控制措施，以阻断KPC酶的流行、减少患者的感染率，缩短住院时间和节约宝贵的医番疗资源。‘豫2007年，浙江省报道了全国第一例产KPC酶肺炎克雷伯菌，随后产KPC酶肺炎克雷伯菌在浙江省及华东地区等省市快速蔓延，可能

6、与东部地区经济发达、医疗水平较高及抗生素的使用有关，给碳青霉烯类抗生素的使用及感染治疗造成严重威胁。近来，产KPC酶菌株在全国也有逐渐增多的趋势并在多个地方造成流+‘睁行。棚，本研究收集了来自全国5个省份9个城市13家医院95株碳青霉烯类抗生素耐药并且产KPC．2型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌，对这些菌株的耐药性、超广谱p-内酰胺酶及质粒介导的AmpC酶基因型、同源性及分子分型和碳青霉烯酶编码基因周围序列进行系统深入的研究，旨在阐明产KPC酶肺炎克雷伯菌的分子流行，耐药特性和传播机制，明确产KPC酶肺炎克雷伯菌株在我国主要流行的克隆分型和携带K

7、PC酶编码基因的转座元件．研究内容包括以下四部分。1．碳青霉烯类抗生素耐药肺炎克雷伯菌的耐药性研究利用Etcst法测定12种抗生素对95株肺炎克雷伯菌的最低抑菌浓度(MIC)。发现95株肺炎克雷伯茵对亚胺培南、美罗培南和厄他培南均显示出从低到高度的III浙江大学博士学位论文中文摘要耐药·陛(MIC值为3->32rag／L)；对头孢他啶，头孢吡肟、头孢西丁、哌拉西林／三唑巴坦和头孢哌酮／舒巴坦均产生很高的耐药性；对环丙沙星和阿米卡星两种抗生素却显示了不同程度的敏感和耐药，MIC值分别在0．38->32和1一>256mg／L范围内变化。但是，

8、这95株碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌对多粘菌素和替加环素则均显示了较好的敏感性，MIC值范围S2mg／L。2．碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯茵同源性研究利用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术和多位点序列分