mif蛋白表达水平及mif基因多态性同结核病关系的研究

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1、重庆医科大学硕士学位论文MIF蛋白表达水平及MIF基因多态性同结核病关系的研究姓名：李艳林申请学位级别：硕士专业：临床检验诊断学指导教师：曾照芳201205重庆医科大学硕士研究生学位论文MIF蛋白表达水平及MIF基因多态性同结核病关系的研究摘要研究背景及目的：巨噬细胞移动抑制因子(MacrophageMigrationInhibitoryFactor，MIF)作为一种促炎性细胞因子，在免疫性疾病的发病机制中起着重要的作用。体外研究表明，MIF可以抑制致病性结核分枝杆菌的生长繁殖。结核分枝杆菌主要感染体内的巨噬细胞，MIF能够抑制巨噬细胞

2、游走，促进感染部位巨噬细胞的聚集、浸润、增生、活化及分泌一些细胞因子从而参与免疫反应。因而，MIF在结核病的发生发展中起了不容忽视的作用。本课题通过检测结核病人和对照组人群外周血清中MIF蛋白的表达水平，并对MIF基因启动子多态性位点．173G／C和微卫星多态性位点．794CATT5．8进行分析，从而讨论MIF与结核病易感性的关系。研究方法：(1)收集结核患者及正常对照组人群外周血，凝固后分离血清；提取所有结核病人和正常对照人群外周血基因组DNA。(2)通过酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中MIF的表达水平，并对其表的水平的差异

3、进行分析。(3)用聚合酶链反应。限制性片段长度多态性(RELP．PCR)的方重庆医科大学硕士研究生学位论文法检测MIF基因启动子．173G／C位点多态性，统计其基因型和等位基因的分布频率，分析其基因多态性与西南地区结核病易感性的关系。(4)通过基因测序技术分析结核病人及健康人群的MIF基因．794CATT5．8微卫星多态性进行检测，统计其基因型和等位基因的分布频率，分析其基因多态性与西南地区结核病易感性的关系。结果：(1)结核病人组血清MIF表达水平为(705．21士67．98)pg／ml，显著高于对照组(355．31+57．29)pg

4、／ml(P<0．01)，表达水平平均升高1倍左右。(2)结核病人组№F．173G／C多态性位点G／G纯合子、G／C杂合子、C／C纯合子基因型频率分别是50．7％、34．4％和14．9％；G、C等位基因频率分别是67．9％和32．1％。健康对照组G／G纯合子、G／C杂合子、C／C纯合子基因型频率分别是68．8％、24．9％和6．5％；G、C等位基因频率分别是81．O％和19．O％。两组基因型及等位基因频率的分布差异具有统计学意义(P

5、5／5(7．9％)，5／6(13．5％)，5／7(10．7％)，5／8(1．4％)，6／6(21．9％)，6／7(24．7％)，6／8(O．5％)，7／7(10．7％)，7／8(8．8％)：健康对照组分别是5／5(12．7％)，5／6(18．8％)，5／7(13．1％)，5／8(O．8％)，6／6(23．3％)，6／7(24．9％)，7／7(3．7％)，7／8(2．8％)。结核病人组MIF一794等位基因CATT5、CATT6、CATT7和CATT8所占比例分别是20．7％、41．2％、32．8％和5．3％；对照组则分别是29．0％、4

6、5．1％、24．1％和1．8％。4重庆医科大学硕士研究生学位论文基因型CATT7／7和CATT7／8，等位基因CATT7和CATT8的分布具有统计学差异(P<0．01)。结论：(1)结核病人外周血清中MIF表达水平较健康对照组升高，提示MIF参与结核病的发生发展过程。(2)在西南地区人群中MIF基因启动子单核苷酸多态性位点一173与结核病易感性相关。等位基因C可能是增加结核病易感性的因素之——o(3)在西南地区人群中MIF基因启动子微卫星多态性位点-794与结核病易感性相关。等位基因CATT7和CATT8也可能是增加结核病易感性的因素。

7、(4)MIF在结核病的发生发展中起重要作用。关键诮：巨噬细胞移动抑制因子，表达水平，基因多态性，结核病，易感性5STUDYOFTHERELATIONSHIPBETWEENMIFLEVEL，MIFGENEPOLYMORPHISMANDTUBERCULoSISABSTRACTBacl【groundandObjectiVeThemacrophagemigrationinhibitoryfactor(MIF)isapro．inflammatorycytokinewhichplaysanimportantroleinthepathogenesis

8、ofimmunediseases．InVitro，studyconnrmsthattheautocrineactivityofⅫFplaysanimportantroleininhibitingthegro