cd4+cd25+调节性t细胞移植对缺血性脑卒中大鼠脑白质的保护作用

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1、泰山医学院硕士学位论文CD4+CD25+调节性T细胞移植对缺血性脑卒中大鼠脑白质的保护作用姓名：唐琴申请学位级别：硕士专业：神经病学指导教师：孙保亮2012-01CD4+CD25+调节性T细胞移植对缺血性脑卒中大鼠脑白质的保护作用研究生：唐琴专业：神经病学导师：孙保亮教授中文摘要目的1．构建脑缺血／再灌注大鼠CD4+CD25+调节性T细胞静脉输注移植治疗模型，探讨CD4+CD25+调节性T细胞输注移植对脑缺血再灌注大鼠脑梗死体积和神经功能的影响。2．通过观察脑缺血／再灌注大鼠cD4+CD25+调节性T细胞输注移植后脑白质组织学相关指标，研究CD4+cD25+调节性T细胞对

2、缺血后脑白质损伤的作用。方法1．选用健康成年雄性Sprague．DaWley(SD)大鼠，体重2759·3009。将动物随机分为：正常组(co)、假手术组(sh狮)和手术组。采用改良的Zealonga线栓法对手术组大鼠施行大脑中动脉阻塞缺血再灌注(MCAO／R)术。手术组分为以下三个亚组：调节性T细胞输注移植组(Treg组)，经股静脉输注移植2×106个大鼠CD4+CD25+调节性T细胞，构建调节性T细胞输注移植治疗模型；脾细胞输注移植组(SP组)，经股静脉输注移植同等数量的脾细胞；PBS输注组(PBS组)经股静脉注入等体积的PBS缓冲液。分别在移植术后24h和72h对大

3、鼠神经功能进行评定，术后72h断头取脑，采用TTc染色和图像分析软件计算梗死体积，并对手术组脑梗死体积和神经功能学评分进行相关统计学分析。2．选用健康成年雄性Sprague．Dawley(SD)大鼠，体重2759．3009。将动物随机分为：正常组(co)、假手术组(sh锄)和手术组。采用改良的Zealonga线栓法对手术组大鼠施行大脑中动脉阻塞缺血再灌注(MCAO／R)术。手术组分为以下三个亚组：调节性T细胞输注移植组(Treg组)，经股静脉输注移植2×106个大鼠CD4+CD25+调节性T细胞，构建调节性T细胞输注移植模型；脾细胞输注移植组(SP组)，经股静脉输注移植同

4、等数量的脾细胞；而在PBS输注组(PBS组)经股静脉注入等体积的PBS缓冲液。术后72小时断头取脑，制备脑组织石蜡切片，免疫荧光染色观察缺血半球寡突胶质细胞(0l适edendrocytes，OLs)及髓鞘碱性蛋白(MBP)、神经丝蛋白200(NF200)标记的轴突，并对0Ls数量及MBP、NF200荧光强度进行相关统计学分析。结果1．调节性T细胞输注移植组脑梗死体积及梗死半球体积占健侧体积的比值较SP组和PBS组均显著减小(p<0．01)；在术后24h、72h神经功能评分实验中，Treg组ZeaLonga评分均显著低于SP组和PBS组(p

5、S评分见Treg组较SP组和PBS组亦显著降低(p

6、调节性T细胞可以减小MCA0／R大鼠脑梗死体积，降低缺血后神经功能缺损，提高神经功能恢复。3．CD4+CD25+调节性T细胞输注移植可以降低缺血对寡突胶质细胞和轴突造成的损害，减轻脑缺血后白质损伤。关键词CD4+CD25+调节性T细胞；大脑中动脉阻塞；缺血性脑卒中；脑白质损伤PRoTEcTIv眦FFEcTOFcD4+cD25+REGuLAToRYTcELLsONwHITEMATTERBYTRANsPLANTINGINTOCEREBRALISCHEMIASTRoK卫RATSPostgraduate：QinTangSpecialty：NeurologyTutor：Profes

7、sorBaoliangSunABSTRACT】．ConstructionatreatlnentmodelofCD4+CD25+regulatory‘I’cellsonischemi“repernsionratsbyintraVen。ustraJlsplantation，ToinVestigatethee丘ects．oninfarctv。1啪eandneur。劬cti。nal。utc。meaRerfocalbrainischemia／repermsl。n1nJuryinratmodelbytranspl眦ingCD4+CD25+