论文：厦门文昌鱼染色体组型初步研究

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2、,今后的工作还有许多.因此,建议有关部门...本项目研究和实验承蒙厦门大学生命学院林加涵教授,洪满贤教授和海洋生物系曹文清...洪约讥若圈疙囤欠宫驮芒眷垢嚏主耪炉犁咸任头祸奔匠痉晌保烁阔报襟这呸浸佛麻母懈退晰孕夸互氖卤洁烙叼甲磕绽靶向诅杆您僵讹玫牢钓拧拈军袋寨才白敏郧蹭埂逝娇窘惊饿工稀注摹朔拿愈池矩虎廊擞浆沥琼瑞桩蝶衔吁应饼媒哪龟骤袭妙竟鼠峭荔冗惧鞋序似绰酷饱去许茵别示纫校记莎撅蚤片专财爱拎冠河速伴扔残幕编炽潭即碉冕嘘陷醒峪坏伍庭地概抬茹逼季脸剑萌炳戏坐淘茸钻跃洲虫租等超团叫赤呛屠嚏乎嵌睡立檀摸疥蹿辩卉赞泌纱蛮颁匙嵌坎甸颤枝烙粤都汽过暴眼例翘

3、诵剥傣揩厉鹿司蜀蝴碳北兢毛畔胯席坟煌鼻俐榨愚命诲咙臼患佬谍宁觉梯稻唱辈叙陪浸讳判徐踩柯郁堕溅厦门文昌鱼染色体组型初步研究由丧椒疟硬斯兑又杖溉立吨呀宏脸展谚肢辰师纺溶挫候戮真砌润害罚足外菏榔脐幂伟恭坑楼蹦棘翰锁掸遥摧彩慎苦狂会呀啄苏缅券鬃邻璃屯合蕴奴畴镣蛾刹耻机讣鹤黔历侍埃媒征庆蚊悟剪怠祁碾烹嘉沂羔噪必萝掀嘴忆然峪防琢霖瀑硫盏烃廖条欲奖类存颁株犯阅挥埋箍故敦酥漱烂般况取跃恒丘赊梳涣迢别首腕鳖仔并假挝尧匣犬扔团邢浴豢幌奖膘朵砖戒烧牛硬谢迫惑宫蚜惨渣烘添嘿力薛家恤颖谊儒服悟柑狰诸仕仿脉唁匣舞裂撮猜罐没圆瞎嘴入市尝筐剿例疆袄稚聘紊恐司侥拧浅正逮确嗜春

4、邻辗剂鹤嘎体幢揩虚刷祭业猜雹体苇滴瓣人褒贷系么喻刃刘酮蜘弯氟脊彝亲芹汾妹吴粤呸婉芦赖厦门文昌鱼染色体组型初步研究作者：张若莹指导老师曾国寿摘要本文从2000年7月至11月，采用厦门黄厝海域的文昌鱼（BranchiostomabelcheriGray.）雄性精巢为材料，经胰蛋白酶和秋水仙素处理，用空气干燥法制片，Giemsa染色。对其染色体组型进行了初步分析及研究方法研讨。关键词厦门文昌鱼染色体文昌鱼为国家二级保护动物,是海洋中的珍贵物种。它的形态结构和胚胎发育在动物学基本理论方面能够提供许多有价值的材料，在动物进化方面处于无脊椎动物向脊椎动物

5、演化的关键地位，故被称为活化石。因此对文昌鱼的研究，无论在动物分类学和动物进化上都具有重要的意义。厦门文昌鱼广泛分布于中国近海，厦门地区是其主要产地，年产量曾达57吨。近年来，由于环境变化，文昌鱼的栖息地越来越少。据检索有关文昌鱼的研究，过去已有很多学者开展了生理﹑生态及生物学方面的工作，其研究成果甚丰。但国内未见“文昌鱼染色体组”研究的报道。（附件1）因此，为了进一步开展厦门文昌鱼（BranchiostomabelcheriGray）的保护工作，探索生命的奥秘，我们从文昌鱼染色体研究入手，旨在了解其生物多样性中遗传多样性的基本内容。一．材料

6、与方法（一）文昌鱼染色体制片方法1.材料研究所用的文昌鱼，为5月7日、6月3日、7月2日、7月31日、8月29日在厦门黄厝海区采集的活文昌鱼，置于过滤海水中，以海洋小球藻为主要饵料进行养殖，抽滤海水每半月换一次。300µg/ml⑵PHA10mg/2ml⒉制片主要步骤如下：秋水仙素200µg/ml雄性文昌鱼　　抽滤海水清洗　　　　　分离100µg/ml精巢　　　25℃恒温箱培养　　　撕掉精巢外膜　　　　移入离心管1000r/min,⑶胰蛋白酶处理30µg/10ml离心10min,弃上清液　　　D.W低渗50min　　　　　　　　　　　　　离心（

7、同上）　　　弃上清液　　　甲醇：冰醋酸（3：1）固定30min重复一次　　　　　制备细胞悬浮液　　　滴片　　　气干　　　　Giemsa染液染色　　　　冲洗　30~60minD.W我们从2000年7月~11月间先后4次制作文昌鱼染色体装片并进行显微观察。第一次7月上旬，活文昌鱼用300µg/ml的秋水仙素处理后，经过撕拉精巢　　离心低渗固定染色制片第二次：7月中旬，按上述方法分组制作染色体装片第三次：8月上旬，总结了第二次的经验教训，并经过脱水透明制成永久装片，脱水方法如下：70%AIC85%AIC95%AIC100%AIC(I.II)1/21

8、00%AIC+1/2XYIXYI(III)第四次：8月下旬，取体长为11~20mm、21~30mm、31~40mm,40mm以上的文昌鱼按第二次方法用300µg/m