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时间:2019-02-21
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1、郑州大学硕士学位论文抑瘤宁及其组方各提取液对S--180荷瘤小鼠的抗癌作用和细胞动力学研究姓名:张孟伟申请学位级别:硕士专业:肿瘤学指导教师:王留兴201204摘要抑瘤宁及其组方各提取液对S.180荷瘤小鼠的抗癌作用和细胞动力学研究硕士研究生’张孟伟导师王留兴教授郑州大学第一附属医院肿瘤科河南郑州450052恶性肿瘤最近几年成为威胁人类健康的最主要因素之一,其发病率呈逐年上升趋势,因此在全世界范围内引起了人们的广泛关注,当今对恶性肿瘤的研究已涉及很多方面,包括其发病原因、耐药性的形成、转移、药物对恶性肿瘤细胞的杀伤作用等,但由于它的发生是一
2、个非常复杂的过程,迄今我们尚未能明确其发病原因,因而对恶性肿瘤的治疗尚无令人满意的方法,只能达到延长患者的生存期,改善生活质量,减小恶性肿瘤对机体伤害的目的。我们在肿瘤学领域还处在探索阶段,还有很多的难题等待我们去解决。对于早期未发生转移的恶性肿瘤,手术切除仍是其首选的治疗手段,术后根据病理及分期来决定是否行辅助治疗;对于中、晚期的恶性肿瘤患者,综合治疗是其主要治疗方法,包括化疗,同时结合放射治疗;对于适合应用分子靶向药物治疗的患者,可以根据期家庭经济情况选用;另外还有CIK细胞生物治疗也是一种可供选择的方法。但传统的治疗方法有时对人体的影
3、响较大,例如食管癌术后由于解剖位置的改变会对消化道功能产生一定的影响;化疗药物在杀伤肿瘤细胞的同时也杀伤了正常的免疫细胞,削弱了人的免疫力,为肿瘤细胞的生长和转移创造了条件;另外分子靶向治疗药物及CIK细胞生物治疗,由于其费用昂贵,在我国现有的国情下还不能普及。而中医药是一个伟大的宝库。早在我国古代就有中医中药治疗恶性肿瘤的记载,由于其有一定的疗效,毒副作用较小,且价格低廉,因此在恶性肿瘤的综合治疗中有其重要的地位。抑瘤宁是我科经过长期的临床实践总结出的一个有效方剂,该方剂为纯中药制剂,由冬凌草、刺五加、龙葵和蛇莓四味中药组成,临床可以根据
4、辩证l摘要和患者的症状进行加减,临床用其水煎剂治疗食管癌、胃癌等消化系统肿瘤,疗效肯定,无明显毒副作用。根据本课题组前期对四味中药提取物体外抗肿瘤实验结果示:四种药物联用时能明显抑制消化系统肿瘤细胞和非消化道肿瘤细胞生长;药物能使Eca.109细胞阻滞于S期,并诱导细胞凋亡;体内试验急性毒性实验证实,其最大给药剂量相当于临床拟用量的126倍,在小鼠体内未发现明显的急性毒性反应;药效学实验显示该药对动物移植性肿瘤H.22、S180的抑瘤率大于30%,并在短期内延长白血病L1210荷瘤小鼠的生存期。本课题主要观察抑瘤宁及其组方各提取液对S.18
5、0荷瘤小鼠的抑瘤作用及其可能的细胞动力学机制。方法:对S.180荷瘤小鼠的抑瘤实验及细胞动力学实验。建立纤维肉瘤S-180荷瘤小鼠模型,将小鼠随机分为两大组,第一组分别是模型对照组(羧甲基纤维素钠2ml/109ig10d):阳性对照组(浓度为0.2%的环磷酰胺20mg/kgip10d);抑瘤宁低剂量组7.479生药/kg,抑瘤宁中剂量组14.949生药/kg,抑瘤宁高剂量组22.419生药/kg;第二组为:模型对照组(羧甲基纤维素钠2rnl/109ig10d);阳性对照组(浓度为0.2%的环磷酰胺20mg/kgip10d):以下四味中药均用
6、其水煎剂,冬凌草低、中、高剂量组2.259生药/kg、4.59生药/kg、6.759生药/kg;蛇莓低、中、高剂量组1.59生药/kg、39生药/kg、4.59生药/kg;刺五加低、中、高剂量组2.259生药/kg、4.59生药/kg、6.759生药/kg;龙葵低、中、高剂量组0.759生药/kg、1.59生药/kg、2.25g生药/kg。所有实验动物组均连续给药lO天,从第一天起开始观察各组小鼠的体重、移植瘤变化及一般情况。于第11天脱臼法处死动物,取瘤体称取瘤重,计算抑瘤率,同时取瘤体组织做成单细胞悬液上流式细胞仪检查各个细胞周期所占比
7、例,探讨抑瘤宁可能的抑瘤机制。结果:抑瘤宁及其组方中各药物的提取液对S.180荷瘤小鼠瘤体的抑制作用:第一组:阳性对照组的抑瘤率为:58.13%,抑瘤宁低、中、高剂量组的抑瘤率分别为:38.61%、41.86%、42.27%;第二组:阳性对照组的抑瘤率为:55.32%;冬凌草低、中、高剂量组的抑瘤率分别为:32.11%、36.59%、38.57%;蛇莓低、中、高剂量组的抑瘤率分别为:31.30%、36.17%、40.24%;刺五加低中高剂量组的抑瘤率分别为:32.92%、34.95%、39.02%;龙葵低、中、高剂量组的抑瘤ll摘要率分别为
8、:28.05%、30.89%、36.18%,他们与模型对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪分析结果:抑瘤宁能将S.180细胞阻滞于S期;冬凌草能将S.180细
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