逍遥散抗抑郁作用及其crebbdnf分子机制的实验研究

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1、成都中医药大学(药学院)二0一二届硕士研究生毕业论文BDNF／MEK．ERK／CREB分子机制实验研究StudyOiltheBDNF／MEK-ERK／CREBMolecularMechanismAntidepressantEffectsofXiaoyaoPowder研究生姓名：彭希指导教师：曾南教授学科专业：药理学研究方向：中药复方的抗抑郁作用研究二。一二年五月目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．1Abstract⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．!；英文缩写词对照表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．5前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。：⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．6技术路线图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．8jI：：女：⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．9l实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯92方法与结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．122．1逍遥散制备和质量控制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯122．2逍遥散抗抑郁作用的实验研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯162．2．1逍遥散对慢性温和不可预知应激(CUMS)结合孤养抑郁模型动物的影响⋯⋯．162．2．1．1动物分组及给药方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．162．2．1．2小鼠慢性温和不可预知应激(CUMS)结合孤养抑郁模型的建立⋯⋯⋯⋯⋯．．172．2．1．3CUMS模型小鼠体重测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯182．2．1．4逍遥散对CUMS模型小鼠自主活动的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯192．2．1．5逍遥散对CUMS模型小鼠糖水消耗量的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯192．2．1．6Morris水迷宫实验⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．2l2．2．1．7逍遥散对CUMS模型小鼠海马与皮质部位单胺类神经递质含量的影晌⋯⋯222．2．1．8逍遥散对CUMS模型小鼠肝脏SOD、MDA水平的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯242．3逍遥散抗抑郁作用BDNF／MEK-ERK／CRE

5、B机制研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯252．3．1逍遥散对抑郁模型小鼠脑内BDNF、CREBmRNA表达的影响(实时荧光定量PCI；t)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯：：52．3．2逍遥散对抑郁模型小鼠脑内ERK及磷酸化ERK、RSK、CREB(p-ERK、P．RSK、P．CREB)蛋白表达的影响(Western．blot)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。332．3．3逍遥散对CUMS模型小鼠血清BDNF水平的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。4l2．3．4P

6、Dl84161对逍遥散影响行为绝望模型小鼠作用的干预⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。423讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．444结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．!；65问题与展望⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．57参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。59综j2罡⋯⋯：⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

7、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．63j}[谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．71成都中医药大学2009级硕士学位论文中文摘要目的：探讨经典名方逍遥散抗抑郁作用的BDNF／MEK．ERK／CREB信号通路机制，揭示BDNF通路在肝郁证及中药疏肝解郁治法中的作用。方法：(1)采用慢性温和不可预知应激(CUMS)结合孤养方法建立小鼠抑郁症模型，并于造模2周后开始给予逍遥散(30，20，109／kg)进行治疗，同时继续造模4周。于造模后不同时间点测定小鼠体重、自主活动、糖

8、水消耗量等行为学指标，并用Morris水迷宫测定小鼠空间学习记忆能力。(2)ELISA法测定逍遥散对CUMS模型小鼠脑内单胺类神经递质含量及血清BDNF的影响：(3)测定逍遥散对CUMS模型小鼠肝脏MDA、SOD的影响。(4)实时荧光定量PCR法测定逍遥散对CUMS模型小鼠脑内BDNF、CREBmRNA的影响。(5)W-estem—blot法测定逍遥散对CUMS模型小鼠脑内ERK，p-ERK，p-RSK及P．CR