我国网络舆论监督研究

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1、郑州大学硕士学位论文我国网络舆论监督研究姓名：刘栩静申请学位级别：硕士专业：行政管理指导教师：杨朝聚201205摘要摘要目的P2X7受体是一种ATP门控的非选择性阳离子通道受体，在中枢神经系统内主要表达在小胶质细胞上，而在外周神经系统的背根神经节(DorsalRootGanglion，DRG)内表达在卫星细胞上。其激活后可引起Na+，Ca2+的内流以及l(+离子的外流，同时调节小胶质细胞内IL．1p的成熟和释放。虽然近年来已有少量文献报道，P2X7受体与神经痛模型疼痛的发生密切相关，但是对于P2X7受体在神经痛疼痛发

2、生机制中的作用仍然不是很清楚。本实验应用脊神经高位结扎(SpinalNerveLigadon，SNL)神经痛模型大鼠，运用免疫荧光、ELISA技术来探讨P2X7受体在神经痛疼痛发生机制中的作用。方法制作SNL大鼠神经病理性疼痛模型，测定疼痛阈值的经时变化过程，以便进行后续研究。采用蛛网膜下腔给药的方法，将P2X7受体特异性拮抗剂考马斯亮蓝(BrilliantBlueG，BBG)注射到SNL模型大鼠体内，每日一次，每次lO此(10州)，连续7日。同时，使用VonFreyFilament来测定大鼠机械性痛闽的变化情况。然

3、后，取大鼠腰骶膨大处脊髓和L4，L5，L6DRG，运用免疫荧光技术观察大鼠脊髓背角上的星形胶质细胞以及DRG上卫星细胞的激活情况。最后，运用ELISA技术检测大鼠腰骶膨大处脊髓背角内IL-Ip的蛋白含量。结果SNL大鼠机械性痛阈经时曲线显示，手术后第3天大鼠术侧脚出现疼痛行为，此疼痛行为可一直持续四周，其中第5天到第15天这段时间内疼痛最为敏感和稳定，缩足阈pawWithdrawThreshold,PWT)≤49。而SNL大鼠手术对侧脚和正常组大鼠则无疼痛行为发生。随后，选取SNL大鼠疼痛最敏感和最稳定的时期，将SD

4、大鼠分为5组，即模型组(SNL手术)、阳性组(SNL术后注射BBG)、阴性对照组(SNL术后注射生理盐水)、正常组(无任何处理)和假手术组。阴性对照组大鼠在第3天、第5天、第7天的缩足阈分别为4．77士1．339，5．22士1．028，4．04士1．679，与模型组大鼠相比无显著性差异，而阳性组大鼠在以上时间点的PWT则显著升高，分别为8．28+1．579、7．9+2．129、7．12+1．389。在免疫荧光试验中，可观察到鞘内注射BBG第7天，阳性组大鼠手术同侧腰骶膨大处脊髓背角内以及L5DRG内GFAP的表达量与

5、阴性对照组和模型组相比都有摘要所下降；在ELISA试验中，可观察到鞘内注射BBG第7天，阳性组大鼠腰骶膨大处脊髓背角内Ⅱ，1B的蛋白含量与阴性对照组相比下降了32％。结论在SNL神经痛模型大鼠的中枢神经系统内，抑制P2X7受体的激活可降低脊髓内成熟儿一1p的蛋白含量，抑制星形胶质细胞的激活；在SNL神经痛模型大鼠的外周神经系统DRG内，抑制P2X7受体可抑制卫星细胞的激活。因此，P2X7受体可能通过调控m．1p的成熟和释放来间接调节星形胶质细胞的激活，同时直接调节卫星细胞的激活从而介导了神经痛疼痛行为的发生。关键词P

6、2X7受体神经痛SNL大鼠蛛网膜下腔注射缩足阈ⅡAbstractObjectiveP2X7RisaATP-selectivevoltage-gatedionchannel，whichisprimarilyexpressedinmicrogliainCentralNervousSystemandsatellitecellofdorsalrootgangliainPeripheralNervousSystem．TheactivationofP2X7RallowsinfluxofNa+、Ca2+andoutfluxofK+

7、，meanwhileitcallmediatetheactivationofmicrogliabytriggeringthematurationandexteriorizationofIL-18inmicroglia．ThoughsomeresearchershavedemonstratedthatP2X7Risinvolvedintheregulationofneuropathicpain，theunderlyingmechanismsarenotfullyexplored．Inthisstudyweusedimm

8、unohistochemistry、ELISAtoexploretherolesP2X7Rplaysinthespinalcordligation(SNL)modelratsofneuropathicpam·MethodsFirst,wemadethetime-courseofpawwithdrawalthresholdof汛ratsandfo