小鼠肺缺血再灌注损伤中1--磷酸鞘氨醇及受体1表达的变化和意义

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1、温州医学院硕士学位论文小鼠肺缺血再灌注损伤中1--磷酸鞘氨醇及受体1表达的变化和意义姓名：祝卿申请学位级别：硕士专业：麻醉学指导教师：林丽娜2012-05-19温州医学院硕士学位论文小鼠肺缺血再灌注损伤中卜磷酸鞘氨醇及受体1表达的变化和意义摘要【背景】1．磷酸鞘氨醇(Sphingosine．1．phosphate，S1P)是鞘脂的代谢产物，可与细胞表面特定受体(S1PG．protein．coupledreceptors，S1PRl—5)结合发挥多种生物学功能。S1P在细胞增殖、移动、凋亡及心血管系统、免疫系统等方面都有重要的调节作用，

2、是目前研究的热点。其在多种肺部疾病(哮喘、慢性阻塞型肺疾病、急性肺损伤)的病理生理改变过程中发挥了重要作用。但在肺缺血再灌注损伤(pulmonaryischemiareperfusioninjury，PIRI)中S1P及其受体1(S1PRl)表达的变化和作用尚未见相关报道。因此S1P及S1PRl是否参与到PIRI的进程需要进行研究。【目的】通过建立小鼠PIRI模型，探讨缺血再灌注后肺组织中S1P及SIPRl表达的变化。【方法】1．制作小鼠PIRI模型：选用健康雄性C57BL／6小鼠，采用结扎左肺门30min复制缺血；松开结扎带，接受再

3、灌注(再灌注时间分别为1h、1．5h、2h、2．5h)。根据肺组织病理切片、湿／干重比结果论证模型制作情况，为下一步研究提供基础。2．检测PIRI进程中S1P、S1PRl表达水平的变化情况：采用聚合酶链反应(PolymeraseChmnReaction，PCR)法检测肺组织中鞘氨醇激酶一1(SphKl，生成S1P的关键限速酶)及S1PRl的mRNA表达；酶联免疫吸附法(enzyme．1inkedimmunosorbentassay，ELISA】检测肺组织中S1P及S1PRl含量的变化。【结果】1．肺组织切片HE染色(Haematoxy

4、linandeosinstain)显示：正常组小鼠肺泡壁结构完整，无炎性细胞浸润。而小鼠肺缺血再灌注1h后，即出现肺组织肺泡结温州医学院硕士学位论文构破坏，毛细血管充血，肺泡隔增宽且有炎性细胞浸润，且随再灌注时间延长，肺组织损伤逐渐加重。2．肺湿／干重比及肺组织损伤评分也与组织形态学改变趋势相一致，随再灌注时间的延长进行性升高(与正常组比较，P<0．05)。而假手术组与正常组相比差异无统计学意义(P>O．05)。3．与正常组比较，缺血再灌可导致肺组织中S1P、S1PRl表达增高。PCR检测显示：在缺血30min再灌注2h后，SphKl

5、和S1PRl的mRNA表达明显增强(P

6、伤2TheExpressionofS1PandS1PRlduringPulmonaryIschemiaReperfusionInjuryinMouseandIt’SSignificanceAbstract[Background]Sphingosine1-phosphate(S1P)isasphingolipidmetabolite．Manyofitsfunctionsareregulatedbybindingthespecificreceptors(S1PG—protein-coupledreceptors，S1PRI一5)oncel

7、lsurface．S1Phasapivotalroleincellproliferation，migration，apoptosisandcardiovascularsystemandinlnlunesystem．Soitbecomesafocusinthecurrentresearch．S1PCanaffecttheoccurrenceanddevelopmentofpulmonarydisorders，includingasthma，chronicobstructivepulmonarydisease，acutelunginjur

8、y．However,littleisknownabouttheroleofS1PandS1PRlinpulmonaryischemiareperfusioninjury(PIRI)．[objective]Toinvest