碳氮比调节在对虾养殖中的作用及优化

碳氮比调节在对虾养殖中的作用及优化

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时间:2019-02-19

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1、中国海洋大学博士学位论文碳氮比调节在对虾养殖中的作用及优化姓名:高磊申请学位级别:博士专业:水产养殖指导教师:马甡201206碳氮比调节在对虾养殖中的作用及优化摘要目前随着我国对虾养殖产业现代化、工场化和集约化程度的发展,高密度的养殖模式使得养殖环境生态系统结构单一,抵抗能力薄弱,长期使用的药物也改变了对虾肠道菌群的正常组成,导致了肠道内微生态环境的失调,同时使药物在养殖生物体内形成残留。近年来应用范围越来越广泛的碳氮比调节(C/N)和有益菌添加等技术已在对虾养殖业中发挥着越来越重要的作用,不仅从根本上完善和优化了养殖微生态系统,改善了水质状况,还可以降低饵料成本

2、,提高对虾养殖产量。但是C/N调节技术对养殖环境中特定细菌种群和浮游动物的影响还有待研究,同时有益菌添加技术也面临着有益菌不能长时间维持,很难形成优势菌种等诸多问题。因此本文主要针对以上问题设计了如下实验内容。本文主要研究了以下几个方面内容:1.C/N调节在凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)养殖中的作用,具体包括对水质因子、对虾产量、浮游动物、异养细菌和氮循环菌的影响;2.对虾养殖环境中多种不同种类的细菌对环境C/N的响应,以及有益菌对有害菌的抑制作用,3.如何利用产纤维素酶细菌对植物纤维素的分解作用来优化C/N调节技术,降低技术成本。作者期望通

3、过本实验将C/N调节与有益菌添加两种手段有效的结合在一起,通过向养殖水体中添加碳源来促进养殖环境中有益菌的生长,从而降低有毒无机氮化合物的水平,抑制有害细菌的繁殖,并可以形成大量生物絮团,为对虾的生长提供良好的环境。本实验的主要研究结果如下:1。碳源添加在对虾养殖中的作用本实验研究了在凡纳滨对虾零换水养殖系统中通过添加碳源对水质指标、对虾生长、浮游动物密度、环境C/N、水体和底质中的总菌和氮循环菌密度等的影响。将蔗糖作为碳源向养殖环境中进行添加,共分5个水平:理论碳源添加量(圜CH=0.465xfeed×(42%/30%))的0%、25%、50%、75%和100%

4、。我们的实验结果表明通过添加碳源,特别是75%和100%的理论碳源添加量可以在养殖后期有效的抑制氨氮(吖忒)和亚硝氮(N02-N)在水体中的积累(P.,0.05)。碳源添加对养殖水体中硝氮(N03-N)、叶绿素a、COD和BOD的浓度水平没有显著的影响。此外碳源添加可以明显提高水体中的C/N和总菌的密度水平(P<0.05),但对于底质中的C/N和总菌密度水平的影响不明显。我们还发现通过添加碳源可以明显影响水体和底质中氮循环菌(亚硝酸细菌、硝酸细菌和反硝化细菌)的密度。碳源添加还可以明显促进浮游动物的生长(氏O.05)。根据本次实验结果我们可以得出结论:75%的理论

5、碳源添加量最适于对虾的生长,包括提高产量、成活率和降低饵料系数。因此,向凡纳滨对虾零换水养殖系统中添加碳源可以有效的改善水质,促进细菌和浮游动物生长,进而为对虾生长提供有利的条件。2.对虾养殖环境中细菌在C/N限制条件下的筛选和鉴定本实验从我国北部沿海地下水养殖环境,中部沿海和南部沿海的多种凡纳滨对虾养殖环境的水体和底质中富集分离出多种细菌,并利用化学方法进行了初步鉴定,共筛选出芽孢杆菌37株,乳酸菌42株,弧菌50株,亚硝酸细菌50株,硝酸细菌60株,反硝化细菌10株。我们进一步利用碳限制和氮限制两种环境进行细菌培养,筛选出对限定C/N条件响应较明显的菌株,并通

6、过16SrDNA序列分析技术对其进行了分析和鉴定,最终共得到每种细菌各4株,鉴定芽孢杆菌、乳酸菌、弧菌、亚硝酸细菌、硝酸细菌和反硝化细菌分别属于芽孢杆菌属、肠球菌属、弧菌属、亚硝化单胞菌属、硝化杆菌属和交替假单胞菌属。本实验所筛选的多种菌株为下一步研究其对培养环境C/N的响应和今后进一步的工作奠定了基础。3.水体C/N对细菌生长及拮抗作用的影响本实验将从凡纳滨对虾养殖池塘中采集分离出的多株芽孢杆菌、乳酸菌、一弧菌、亚硝酸细菌、硝酸细菌和反硝化细菌在不同水体C/N(2、5、10、15、20)的环境下进行培养,研究养殖环境营养水平下六种细菌的生长,以及芽孢杆菌、乳酸菌

7、和弧菌的竞争水平及细菌菌体C/N的变化。研究发现,芽孢杆菌在水体C腻=15时生长水平最好(密度最高为6.7x107cells/m1),乳酸菌适宜在较高的水体C/N下生长(水体C/N=10、15、20;密度最高为2.6x101ceUs/m1),弧菌适宜在较低的水体C/N下生长(水体C/N=5、10;密度最高为5.1x107eells/m1),亚硝酸细菌和硝酸细菌对C/N的响应不明显,反硝化细菌在水体C/N=10的环境中生长较好(密度最高为2.6×101cells/m1)。在芽孢杆菌与弧菌混合培养的实验中,当水体C/N=10、15与20时,培养24h时芽孢杆菌密度>2

8、.5×10

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