上海地区手足口病病原谱分析及ev71血清学流行病学研究

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1、硕士研宄生学位论文上海地区手足口病病原谱分析及EV71血清学流行病学研究姓名：徐梦华学科：临床检验诊断学导师：徐锦副研究员导师小组成员：林勇副主任技师周丹秋副主任技师目录中文摘要1英文摘要3._S—,HOs6第一部分上海地区HFMD病原谱分析8研究对象与方法811vii^i26第二部分EV71血清学流行病学研究31研究对象与方法3135Hit38^40参考文献41附录一综述48附录二研宄生期间发表的论文

2、62蘭63复旦大学硕士学位论文中文摘要中文摘要目的手足口病（Handfootandmouthdisease,HFMD)是肠道病毒引起的常见全球性传染病，以婴幼儿发病为主。本研究通过分析上海地区HFMD的主要病原谱，了解导致HFMD的主要病原及其致病特点；通过对不同年龄段HFMD患儿和非HFMD人群中EV71特异性中和抗体的研宄，认识上海地区EV71的血清学流行病学特征，以此增强对HFMD流行病学的全面认识，为HFMD的防治提供基础数据和理论依据。方法一、收集2010年5月-2011年4月在复旦大学附属儿科医

3、院住院且临床诊断确诊为HFMD的患儿粪便标本290份。通过巢式RT-PCR的方法，采用基于VP1区保守片段设计的引物扩增目的片段并将产物测序进行肠道病毒的基因分型。使用MEGA4.1序列分析软件进行系统进化树的绘制和基因序列的分析。收集所有患儿的临床资料，比较不同型别感染组之间临床表现的差异。二、收集2010年7月-2011年1月在复旦大学附属儿科医院住院并临床诊断确诊为HFMD的患儿急性期血清标本95份。收集同时期复旦大学附属儿科医院门诊或住院并且临床诊断排除为HFMD的儿童血清标本164份以及来自于复旦大学附属妇产

4、科医院产后一周内的产妇血清标本23份。通过细胞培养微量板中和抗体的方法检测血清EV71特异性中和抗体。三、通过SPSS17.0统计分析软件对研宄结果和临床资料进行统计分析。结果一、致HFMD的主要病原及其致病特点如下：290份HFMD患儿的粪便中肠道病毒总检出率95.5%,除8例未能分型外，其余共检到9种不同型别，包括EV71(63.8%).CA10(9.0%)、CA6(8.3%)、CA16(6.9%),CA12(2.4%),CA4(1.4%),及CA14、Echo6、HEV-C各一例。6岁以上的患儿只检测到EV71与

5、CA16两种肠道病毒的感染，而6岁以下的其他4组患儿至少感染了6种不同的肠道病毒型别。上海地区EV71株为C4a基因亚型，CA16属于B基因型。其他肠道病毒型别的进化树分析显示，CA6与日本、台湾及国内的CA6株亲缘关系最近。CA10、CA12、CA4及CA14各型别均与国内分离得到的参比株亲缘关系最近。290例HFMD患儿的年龄为6-153个月(31.6±19.2M)，男性占63.1%(183/290)，平均住院天数3.7±1.5d;其中49%的患儿出现脑炎、脑膜脑炎、脑膜炎等并发症。与非EV71感染组比较，EV71

6、感染组的发病年龄（33.8±20.3Mvs27.8±16.3M，P<0.05)、住院时间（4.1士2.4dvs3.2±l.ld，P<0.001)、并发症的出现率（57.8%vs33.3%,P<0.001)明显高于非EV71感染组。CA6感染组、CA10感染组、CA16感染组的住院天数和并发症的发生几率均显著低于EV71感染组1复旦大学硕士学位论文中文摘要(P<0.05)。CA12感染组的发病年龄最小，与其他非EV71感染组比较，其并发症的发生率有升高的趋势。二、EV71感染的血清学流行病学特征如下：在非HFMD人群中，

7、EV71特异性中和抗体的阳性率为51.8%,不同性别之间的抗体阳性率无明显差异。6个月以内小婴儿的EV71抗体阳性率为64.3%(18/28)，后随年龄的增长逐渐下降，1-2岁时降至28.6%(8/28),之后随年龄稳步升高，6岁后达76.5%(26/34)，与产妇组(69.6%,16/23)相近。EV71中和抗体的整体水平较低（滴度中位数1:8)。<6M组的EV71中和抗体水平与产妇体内的抗体水平相近，随着年龄的增加逐渐降低,12-23M组降至最低，之后随年龄的增长缓慢上升，6岁之后升至最高。HFMD患儿急性期血清中

8、EV71特异性中和抗体的阳性率为35.8%，明显低于非HFMD人群的阳性率()，男性患儿的抗体阳性率显著高于女性患儿(43.1%vs20%,P<0.05)oHFMD患儿血清中EV71中和抗体的中位水平（<1:8)较非HFMD人群更低，其中和抗体阳性率和抗体水平随年龄变化的趋势与非HFMD儿童相似，抗体阳性率和抗体水平的最低点均在2